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标题: 有谁用matrigel养过小鼠ES嘛？？ [打印本页]

作者: igdb 时间: 2011-12-21 13:54 标题: 有谁用matrigel养过小鼠ES嘛？？

如题，准备做一点工作，还多谢指导。比如稀释比例是怎样的，需不需要特殊培养基？？或者小鼠ES有什么其他FEEDER-FREE的培养体系？4 n5 K2 y% F* a# M: m

作者: coralqin 时间: 2011-12-26 16:46

我用过BD的。步骤为：Matrigel™ Matrix Growth Factor Reduced (GFR) matrigel 4℃过夜融化后，用预冷tip（4℃）加入一定体积D/F12，以150μL/ cm2的浓度包被培养皿，37℃放置1h。制备好的Matrigel流动凝胶形成三维结构，细胞直接接种其上就可以了。

作者: coralqin 时间: 2011-12-26 16:47

我这种是thick-gel的铺法，是用来使细胞分化的，还有一种是thin-gel,促进细胞增殖的，具体用法说明书上都有的。

作者: coralqin 时间: 2011-12-26 16:48

我这种是thick-gel的铺法，是用来使细胞分化的，还有一种是thin-gel,促进细胞增殖的，具体用法说明书上都有的。

作者: siyue13 时间: 2011-12-27 22:11

也可以用ESGRO无血清无饲养层的培养基

作者: sarah19860420 时间: 2012-2-4 01:46

回复 coralqin 的帖子" ?5 T3 ?' J6 C) @8 o! F

你好，我的实验也要用到这个BD的matrigel，我是按照wi-cell的protocol做实验，他是按照浓度计算的，我想知道matrigel的浓度是说明书首页的那个protein concentration吗，+ k; S, |2 z$ Z" {0 A. q" q2 u
另外我还想了解下，我只是想让我的IPS克隆在MATRIGEL上增殖，你是不是就是说我如果不按照浓度铺板，就应该用THIN-GEL呢，第一次做这个实验，心理没谱，所以想确认下，谢谢

作者: bigben446 时间: 2012-12-16 23:54

sarah19860420 发表于 2012-2-4 01:46 m% w9 C- z5 U0 t+ Z9 }1 ^
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基质的稀释倍数由BD Biosciences根据每批号的蛋白质浓度计算。+ P. D6 V/ V. J9 G* X; y$ Z7 p1 D7 z
蛋白质浓度请参阅产品的指定分析认证，也可根据LOT货号在线查询获取。9 ?+ R/ v1 P+ r) i) w: v4 P
http://regdocs.bd.com/regdocs/searchCOA.do

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