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标题: 脐带间充质干细胞分离和培养问题 [打印本页]

作者: tkpss18 时间: 2011-12-29 09:25 标题: 脐带间充质干细胞分离和培养问题

大家好，我想请问一下有关这两个组织的培养问题。' c$ l! k" e$ e6 T9 @
我们现在是利用组织平布法来培养脐带间充质干细胞的，我们一般要等大概7-8才会有细胞爬出来。然后我们发现也不是每一块组织碎片也会有细胞爬出来，大概是每10块有2块是有细胞爬出来的。而且细胞爬出来以后生长速度也比较慢。我们用的培养基是15%PBS+84%DMEM+1% L-Glutamine+50ul Gentamicin. 我们是在第6天换第一次液，然后每4天换一次，我想问一下大家是多久换液一次的？然后你们一般会等多久才把组织块从培养皿上去掉？

作者: 都市青蛙 时间: 2011-12-29 10:00

15%PBS+84%DMEM+1% L-Glutamine+50ul Gentamicin？？？？! @ [# G0 p Q& e* m9 C6 k+ \4 r0 J
都不用血清的呀

作者: tkpss18 时间: 2011-12-29 10:04

不好意思，是FBS才对。。谢谢。

作者: leungyk 时间: 2011-12-29 10:43

我們用DMEM/F12+10% FBS+glutamax，每3-4天換液，亦不是每塊組織都有細胞爬出來，都是大約7-9天才會有細胞見到2 E" S/ \1 ?) `
我們亦發現StemPro+10%FBS會長得比DMEM/F12快1-2天 (如果StemPro沒加FBS，就跟DMEM/F12差不多)

作者: 漂泊的风 时间: 2011-12-29 15:53

一般要一周才到组织块，当然也要看脐带，有的脐带爬出细胞的速度很慢，要十来天才能长满，要是具体情况而定。

作者: tkpss18 时间: 2011-12-30 10:59

回复 leungyk 的帖子0 b+ e3 o% ~1 n

那你们是有细胞爬出来就直接把组织去掉？还是会先保留组织块？如果保留组织块的话，要让细胞长到什么程度才可以把组织去掉？然后细胞爬出来以后你说是3-4天换液，那你们是半换液还是全换液了？谢谢。

作者: tkpss18 时间: 2011-12-30 10:59

回复漂泊的风的帖子

那长不出来的组织块，你们会怎么处理？

作者: leungyk 时间: 2011-12-30 14:28

tkpss18 发表于 2011-12-30 10:59
2 {# C& @$ j7 m' \7 U7 ~回复 leungyk 的帖子
$ z7 a+ V: o( a" s/ m/ }% H$ t0 w4 s/ [1 _: N1 Z$ y
那你们是有细胞爬出来就直接把组织去掉？还是会先保留组织块？如果保留组织块的话，要 ...

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我們會保留組織塊至傳代才去掉
是全換液的* T- s( x7 W3 J# O* O- V

作者: tkpss18 时间: 2011-12-30 14:39

回复 leungyk 的帖子3 M2 [& Y5 n' P0 D' ]' T2 W6 U

学习了，谢谢~

作者: shashou_com 时间: 2012-2-3 17:08

回复 tkpss18 的帖子
r7 L3 B3 p# W# n; H/ f
一周后换液一次，保留组织。等待细胞长满整个培养瓶后才传代，去掉组织块。

作者: xiaolong 时间: 2012-2-15 09:50

3,4天换液，全换，可以留少许的残液，传代时把组织块除去

作者: 雁南飞 时间: 2012-2-16 14:29

按这个培养基试试% b; W9 U: n7 S/ a* `, S6 {

名称量
胎牛血清 20ul/ml
表皮生长因子 50ng/ml
成纤维细胞生长因子 10ng/ml4 S$ Q+ W0 Q6 n/ l+ p
基础培养基 DMEM/F12混合培养基
抗生素青霉素+链霉素+ `/ G p9 m* W/ t6 w% U/ E

作者: alex19901 时间: 2021-1-22 18:30

有细胞从组织块中爬出来后，不用刻意去除组织块，但是随着换液脱落的组织块就顺其自然让其脱落即可。

作者: 18627000462 时间: 2025-2-15 09:58

前来学习

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