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标题: 细胞团缩成团脱落 [打印本页]

作者: zarecol 时间: 2012-1-2 14:42 标题: 细胞团缩成团脱落

组织块贴壁法养的脐带间充质干细胞，传至P3时观察细胞，整瓶长的很好，偶然发现有一块细胞出现了如下情况，望有经验的老师给予帮助，看看是怎么回事
上个图--attachimg]37432[/attachimg

作者: aminhair 时间: 2012-1-2 16:10

是不是细胞没有铺匀啊？具体说一些操作过程吧。

作者: huangcong1988 时间: 2012-1-2 16:23

个人也觉得细胞不是很均匀，密度不是很均匀

作者: lemma710 时间: 2012-1-2 22:36

会不会是传代的时候这里有个气泡，然后细胞就不在这一片生长了，等细胞增殖起来了，增殖的细胞飘落到这片区域，也就有了照片上这种情况~

作者: zarecol 时间: 2012-1-3 08:44

吹的挺均匀的，细胞是往一起聚然后脱落的！

作者: pailishi 时间: 2012-1-3 09:47

楼主的意思是不贴壁脱落了？我们没有遇到过这样的情况，貌似养一二十代都没问题啊，不过有可能老化什么的

作者: 新疆八钢 时间: 2012-1-3 10:23

回复 zarecol 的帖子 ^9 ]& Z6 ~/ j3 K
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是增殖后的细胞成片（Cell layer）脱落，又重新贴壁后形成的，最可能是你的培养瓶部分有瑕疵，下次再有这种情况，你得换另外型号的培养瓶了。

作者: 漂泊的风 时间: 2012-1-3 13:40

我们培养是也有这样当前的情况，不过不影响细胞形态，估计是接种时没有吹匀所致。

作者: 漫游天龙八部 时间: 2012-1-4 14:13

是接种时没有吹匀所致，小块组织团周围长出细胞，不影响实验的

作者: sdwzg119 时间: 2012-1-5 10:04

就是接种是细胞没吹匀所致

作者: askage 时间: 2012-1-5 10:40

本帖最后由 askage 于 2012-1-5 10:46 编辑

铺的不均匀，局部生长过密【融合度有个80%就可以了，别太密】。如是血清培养基，过密培养容易分化；如是无血清培养基（尤其是自己实验室山寨搞出来的那种），过密容易脱落死亡（感觉象是贴不牢），瓶子底铺层基质，有助于改善这种现象。MSC只要用酶消化后，尽量不要让它长太密。原代组织块法培养，感觉再密都没关系，只要传代后，就不能过密。消化法/组织块法培养的原代MSC对于密集的耐受性不大一样，传代后就一样【凭感觉，无数据】。

作者: weisong1015 时间: 2012-1-5 12:18

我也出现过那种现象，是细胞增殖后铺满瓶底，之后卷成团，瓶底剩余的细胞又增殖使然。' B, M. ?( [+ [
也可能是培养瓶不行，细胞贴比率不高

作者: deshenglll 时间: 2012-1-6 16:37

细胞传代的时候没有吹匀啊。过滤的不好。

作者: zarecol 时间: 2012-1-6 22:17

我后来观察可能是气泡的问题，没吹匀的话应该是局部比较密集，但不会聚团

作者: zarecol 时间: 2012-1-7 16:03

恩，据我后面观察，气泡的可能性较大，希望得到大家的重视，培养液出现气泡的话局部会出现细胞缺失，还可能造成局部细胞营养不良。

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