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标题: bFGF的问题 [打印本页]

作者: 白巧克力 时间: 2012-1-7 23:48 标题: bFGF的问题

求教：
invitrogen的bFGF可否用invitrogen的D/F12培养基来配置。稀释后，分装冻存。( x( T1 v& z4 O
（10μg的，其实也配不了几瓶medium...） K- h+ X/ w1 u Y( Q2 d

作者: 白巧克力 时间: 2012-1-7 23:53

补充：/ C2 R5 C3 A9 J _' W% K
配制前，室温稍甩。, F m' R& t" G" {9 w- D9 ?3 q6 l
主要是用买来液体的medium配，比较放心。

作者: dianying 时间: 2012-1-8 06:19

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你是用买来的粉加DMEM/F12 吗？
我用的都需要加glycerol、BSA、DDT 和PBS配好后分装存在-20C.
放进DMEM/F12 我还没有见过这样做的--也许吧。建议你bFGF用新鲜的最好。

作者: yangpan521 时间: 2012-1-8 09:38

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我们是用10%的BSA来配置的，分装后，-20保存。

作者: 白巧克力 时间: 2012-1-8 12:00

回复 dianying 的帖子+ `7 M v$ S/ {

不是powder，是liquid的DMEM/F12，就是为了不用过滤啊！
是的，我想加了后就分装冻了啊，然后就是用一支取一支啊- {: m7 J6 K5 n2 n, b8 A
只是不知道用DMEM/F12会不会影响bFGF。

作者: houbara 时间: 2012-1-8 13:48

PBS with 10%BSA 来配置的，分装后，-80 or -20保存,注意分装的浓度不要太低。

作者: dianying 时间: 2012-1-9 09:39

回复白巧克力的帖子# |, H& f# v7 a6 K. ]- M: }
! A/ u# w7 ~; @6 K N! G
我通常配置到 100ng/uL
加50% glycerol, 25% BSA, DDT 和 pbs 之后分装到1.8的小管里存-20c几个月都没问题的。如果你把它保存在DMEM/F12中会很麻烦,DMEM/F12通常应该保存在4c。如果硬放在-20c的话，你每次用还得化冻，每次用的量也不一定相同，bFGF是不应该反复化冻的。

作者: meister 时间: 2012-1-9 10:12

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各个公司的bFGF应该配置方法不太一样。因为购置的bFGF里面有不同的添加剂。
比如盐分，BSA等等。所以根据你购置产品推荐，如果用水溶或者PBS缓冲液溶，你可以用培养基替代。/ O1 h }4 ?" T$ T* m3 t

作者: zerollx 时间: 2012-1-19 23:17

我用Tris-HCL配的

作者: 人在日本 时间: 2012-1-20 00:45

不是吧，应该是有专门的配置液，然后再加入到medium中，不然怎么消毒呐

作者: sino85196488 时间: 2012-1-20 08:46

我们也是用DMEM/F12 or PBS配置的，配置后过滤，未发现明显的不同。- e j: O% h5 J5 L3 [

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