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标题: bFGF的问题 [打印本页]

作者: 白巧克力 时间: 2012-1-7 23:48 标题: bFGF的问题

求教：( W* z( g$ h1 W" I/ l& V8 x" g8 U
invitrogen的bFGF可否用invitrogen的D/F12培养基来配置。稀释后，分装冻存。
（10μg的，其实也配不了几瓶medium...）

作者: 白巧克力 时间: 2012-1-7 23:53

补充：) ]& H$ Y' u. B1 Y7 _+ k0 F
配制前，室温稍甩。* ]. o; r4 _! t) b' i7 Q, R, `
主要是用买来液体的medium配，比较放心。

作者: dianying 时间: 2012-1-8 06:19

回复白巧克力的帖子9 C4 B6 J$ Q* @$ e% P' H" R
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你是用买来的粉加DMEM/F12 吗？0 ?* u8 L" W4 ~1 E7 I
我用的都需要加glycerol、BSA、DDT 和PBS配好后分装存在-20C.
放进DMEM/F12 我还没有见过这样做的--也许吧。建议你bFGF用新鲜的最好。

作者: yangpan521 时间: 2012-1-8 09:38

回复白巧克力的帖子8 l& @1 t6 i5 N% k

我们是用10%的BSA来配置的，分装后，-20保存。

作者: 白巧克力 时间: 2012-1-8 12:00

回复 dianying 的帖子/ G: b$ b4 w8 W: a

不是powder，是liquid的DMEM/F12，就是为了不用过滤啊！
是的，我想加了后就分装冻了啊，然后就是用一支取一支啊8 ?+ r8 |! o$ i
只是不知道用DMEM/F12会不会影响bFGF。

作者: houbara 时间: 2012-1-8 13:48

PBS with 10%BSA 来配置的，分装后，-80 or -20保存,注意分装的浓度不要太低。

作者: dianying 时间: 2012-1-9 09:39

回复白巧克力的帖子4 U. d# N# x* g/ \% r6 ?
: ]. G6 @3 M' G3 U8 v) n
我通常配置到 100ng/uL
加50% glycerol, 25% BSA, DDT 和 pbs 之后分装到1.8的小管里存-20c几个月都没问题的。如果你把它保存在DMEM/F12中会很麻烦,DMEM/F12通常应该保存在4c。如果硬放在-20c的话，你每次用还得化冻，每次用的量也不一定相同，bFGF是不应该反复化冻的。

作者: meister 时间: 2012-1-9 10:12

回复白巧克力的帖子
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各个公司的bFGF应该配置方法不太一样。因为购置的bFGF里面有不同的添加剂。
比如盐分，BSA等等。所以根据你购置产品推荐，如果用水溶或者PBS缓冲液溶，你可以用培养基替代。

作者: zerollx 时间: 2012-1-19 23:17

我用Tris-HCL配的

作者: 人在日本 时间: 2012-1-20 00:45

不是吧，应该是有专门的配置液，然后再加入到medium中，不然怎么消毒呐

作者: sino85196488 时间: 2012-1-20 08:46

我们也是用DMEM/F12 or PBS配置的，配置后过滤，未发现明显的不同。) ]! t( A3 ~* @1 W8 x4 h4 u

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