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标题: 细胞总污染，貌似是真菌，请教大家有什么好办法处理？ [打印本页]

作者: ziluo11 时间: 2012-1-29 16:28 标题: 细胞总污染，貌似是真菌，请教大家有什么好办法处理？

自从决定做干细胞，问题就不断，现在面临最大的问题就是：污染，好像是真菌，总长在水盘里面，不管怎么处理都不能完全杀灭，实在不知道该怎么办了，哪位也遇见过这样的问题，有没有什么好办法

作者: yylhxylong 时间: 2012-1-29 18:17

试试把整个培养箱清空，然后再熏蒸试试把~具体的我不太明白不过论坛里有很多这样的帖子吧

作者: yuhaoze 时间: 2012-1-29 19:20

水盘是什么

作者: shashou_com 时间: 2012-1-29 20:04

把培养箱先用75%酒精全部擦一次，然后紫外消毒一小时，有条件的话，臭氧熏一下。再次是水盆里加水时，你要保证是无菌的水。

作者: xbqian 时间: 2012-1-30 08:58

1。保证环境洁净，做好环境卫生后定期用紫外照射。) D& n- }3 `/ I) W- d1 R, J
2。培养箱清洁，使用楼上介绍的方法。
3。培养皿或培养瓶使用前保证洁净无菌，操作要小心奥，有时候菌就是自己带进去的。 o# b' v7 M$ X: V S E( f- L
4。可适当加入抗菌素。

作者: dongxin 时间: 2012-1-30 09:59

定期更换水盘里的水，像Milli Q水就可以；其次就是注意整体环境及局部小区域的洁净无菌。祝好运

作者: 流泪的鱼 时间: 2012-1-30 10:00

把培养箱清空，水盘除了75%的酒精擦，还要用95%的酒精烧，甲醛熏蒸，紫外照射，培养皿和培养瓶全部换成无菌的，移液管和离心管也要换，培养基和血清重新过滤，总之，要彻底地消毒！

作者: sino85196488 时间: 2012-1-30 11:06

你的培养箱里肯定已经被污染了，只清理水盘或者表面是没有用的，将培养箱内容所有能拆开的物件都拆开，能高压的（不锈钢）就灭菌，不能高压的就用紫外找，酒精擦洗。开始时每天都清洗，2周后改为隔天清洗，使用酒精即可。在这期间一周用高压灭一次能灭菌的东西。我们就是这样去除了真菌的。后面及时不污染了，也要每周进行擦洗，隔1个月彻底打理一次才可以。

作者: zhaogy604 时间: 2012-1-30 13:41

定期对培养箱进行消毒灭菌，然后一定要用无菌水

作者: nmgnydxgy 时间: 2012-1-31 15:51

1. 给培养箱消毒，建议把培养箱内能拆下来的部件都拆了，然后用干热法或高温高压法灭菌。拆不下来的用70%的酒精仔细清洗。
2. 试验中，用到的器皿，工具以及药品试剂要严格消毒（干热，高温高压，过滤灭菌等适当使用）。
3. 试验过程中，操作要在无菌工作台中进行。无菌工作台使用前要至少用紫外灯照1个小时。

作者: happyab 时间: 2012-1-31 16:36

更换空气过滤膜！
对已经受到污染的的物品进行清除，无法清除的应使用高温加热灭菌
对操作台、设备材料、实验室进行全方位做物理消毒灭菌。个人推荐紫外灯法！$ z% K- x: S5 i6 K# T2 N- z
重新制定实验室严格的消毒规程！

作者: ziluo11 时间: 2012-2-2 21:14

谢谢大家，我的实验已经停了，全面开始杀毒灭菌，我会按照大家提供的方法处理的，希望早日消灭真菌！哎，请赐予我力量吧！

作者: killua 时间: 2012-2-3 09:16

要看你是什么牌子培养箱，有些培养箱自带灭菌功能。0 g3 `+ Q* e* T# r9 d! E- }2 z
不过甲醛熏蒸这是最彻底的办法。

作者: bioaizhiying 时间: 2012-2-19 12:46

水盘可倒入无水乙醇，点火烧一下（不过要注意安全，别烫到自己）。然后倒入高压过的蒸馏水就可以。

作者: 何露 时间: 2012-2-20 09:45

回复 nmgnydxgy 的帖子
: Q: x' D: F# C5 f, P
无菌工作台使用前是不能用紫外灯照1个小时的，时间太长，形成臭氧反而对细菌起到保护作用，达不到灭菌的效果了

作者: xbs530515 时间: 2012-2-20 21:12

最可能是霉菌污染，需要对环境包括培养箱进行彻底消毒。有条件当然应该进行熏蒸。实在不行的话，可以考虑用新洁尔灭进行全面擦拭。使用过程中，培养箱要定期进行酒精擦拭，一般不会出现这样的大污染了。

作者: Jwian 时间: 2012-2-21 00:10

彻底清洁消毒超净台培养箱之后，整杯灭菌的饱和硫酸铜放在培养箱里面吧。

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