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标题: 胚胎神经干细胞的鉴定 [打印本页]

作者: safflower    时间: 2012-2-3 14:46     标题: 胚胎神经干细胞的鉴定

最近正在做胚胎神经干细胞的培养,还挺顺利的。用NESTIN鉴定出来了,取材只是脑部。( S1 H" O; P2 ^, B% e" a1 E
请问一下各位高手,NSCs的鉴定还需要进一步确定吗?是否需要多种鉴定方法才能被认可?
作者: bllx58    时间: 2012-2-4 17:53

当然,既然是干细胞,能分化到神经元和胶质细胞吗,另外,一个Nestin的Marker不可靠吧,Sox2、CD133都应该检测
作者: safflower    时间: 2012-2-5 12:41

非常感谢!可以进一步分化到神经元和胶质细胞,并且也鉴定出来了。用血清刺激分化效果挺好的。
! L( O' n" N/ }. z: G1 G. N6 G3 p
6 l) B' {% s& F$ D另有一问题困惑:神经干细胞的传代。我试过两种方法:一种是直接吹打传代,这种方法对细胞损伤较小,也很快又长起来了,但不能吹散均匀成单个细胞,还是有较大的细胞团;另一种方法是胰酶消化法,消化时间2-3分钟,可以成单个细胞,但对细胞损伤很大,得好几天才能再长起来。
7 {8 H  U# R8 H9 \* Y* b请问是不是我的方法上有问题?多谢指教!
作者: safflower    时间: 2012-2-7 10:14

怎么没人解答呀?
作者: 人在日本    时间: 2012-2-7 10:57

safflower 发表于 2012-2-5 12:41
) _# s1 F! `% V5 @- Q非常感谢!可以进一步分化到神经元和胶质细胞,并且也鉴定出来了。用血清刺激分化效果挺好的。- T% n, j" ?/ L3 ?4 ]

0 S! o3 U3 q+ W- W' Q; k1 n7 J另有一问 ...
* I1 i1 q. ?& Q
一般都是用胰E消化再吹打的
作者: safflower    时间: 2012-2-9 09:22

谢谢!胰酶消化多长时间呢?
作者: 123jiaoyue    时间: 2012-9-21 21:47

回复 safflower 的帖子# v7 Z# J8 p3 o8 O! J
! ]' |: V2 y) ~2 B) s5 B1 e
用流式做的么?请教一下 是间标还是直标啊 SOP能传授一下么 获取之后设门是怎么射的啊6 H: A8 T; ^7 E' @

作者: safflower    时间: 2012-9-24 09:48

体外原代培养
作者: 细胞海洋    时间: 2012-9-24 21:53

回复 safflower 的帖子
* J: |* Q) ^1 d! P8 x3 E7 \/ n
; Q# D) P4 G' l0 Z/ K
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  K1 v: x( e$ G8 b* B- w4 s/ E$ _( R( s1 ], w: e' L! k& H
否则他会看不到
作者: 细胞海洋    时间: 2012-9-24 21:53

回复 123jiaoyue 的帖子8 @% e- A6 u9 E* Q

5 A& p" H( X* X9 o9 Q看8楼
作者: 辛西雅    时间: 2012-9-25 13:35

回复 safflower 的帖子3 V+ y2 ?0 @$ x
- u4 e1 Z/ Z- p, C7 ]( A* ?
放培养箱里消化,2到3分钟就好,放显微镜下看看,十字交叉晃匀




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