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标题: BMSC细胞第五代长出形态完全不同的细胞 [打印本页]

作者: hygene 时间: 2012-2-5 22:24 标题: BMSC细胞第五代长出形态完全不同的细胞

本帖最后由细胞海洋于 2012-2-18 00:24 编辑 2 M6 p. C& n8 N7 f8 J
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BMSC细胞第五代长出形态完全不同的亚克隆细胞集落，它来源于BMSC，却把周围BMSC推开生长，请有此经历的同仁帮忙分析一下，谢谢) r. g. `: _0 z$ }& I
上PP:[attach]38733[/attach]& w. y8 @, @8 Z! v8 H

非常感谢各位同行的热心回帖。本帖的目的是希望各位遇到此种现象的同行谈谈出现这种情况有何科学研究意义，或者如何进行下一步深入研究，或者传阅交流类似报道现象的文献。”

作者: hygene 时间: 2012-2-5 22:40 标题: BMSC细胞第五代长出形态完全不同的细胞

本帖最后由 hygene 于 2012-2-5 22:42 编辑
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BMSC细胞第五代长出形态完全不同的亚克隆细胞集落，它来源于BMSC，却把周围BMSC推开生长，请有此经历的同仁帮忙分析一下，谢谢
上PP:[attach]38736[/attach]

作者: luoziwei 时间: 2012-2-6 09:58

图像不清楚

作者: bunny19870512 时间: 2012-2-6 10:32

左边的细胞？看起来像上皮啊。。。

作者: ditiger 时间: 2012-2-6 11:21

这种细胞集落贴壁性如何？如果贴壁性差，可以通过轻轻吹打将其与MSC分开。

作者: wangzhihong 时间: 2012-2-6 13:26

想内皮样细胞，建议做个FACS看看6 G( \# \5 X+ ], S. g; p

作者: hygene 时间: 2012-2-6 13:28

左边的细胞已经用多种方法（包括流式、体外分化、染色等）验证是BMSC。这种新长出来的细胞（右边的）贴壁性很好，增值能力也很强，我是想向有经验的同仁们请教这种细胞培养出来有没有意义。我已经传了13代了，2天传一次，而之前BMSC需要5天才能铺满。

作者: hygene 时间: 2012-2-6 13:29

回复 wangzhihong 的帖子$ e# {; w! {4 E5 A4 g
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左边的细胞已经用多种方法（包括流式、体外分化、染色等）验证是BMSC。这种新长出来的细胞（右边的）贴壁性很好，增值能力也很强，我是想向有经验的同仁们请教这种细胞培养出来有没有意义。我已经传了13代了，2天传一次，而之前BMSC需要5天才能铺满。

作者: hygene 时间: 2012-2-6 13:29

回复 ditiger 的帖子' a. [& N$ Z1 D
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左边的细胞已经用多种方法（包括流式、体外分化、染色等）验证是BMSC。这种新长出来的细胞（右边的）贴壁性很好，增值能力也很强，我是想向有经验的同仁们请教这种细胞培养出来有没有意义。我已经传了13代了，2天传一次，而之前BMSC需要5天才能铺满。

作者: wangzhihong 时间: 2012-2-6 13:37

回复 hygene 的帖子1 t+ s4 W" A0 z8 O* Z) s

我最近做小鼠的fat来源的MSC，做的时候，发现有类似内皮的细胞形成，而且形成克隆样生长，长势也很好，之前也是验证过时MSC的，但是至于为什么出现这种情况，是分化了，还是说这种情况下也是MSC，我也不确定，所以我建议，这样的细胞也再做一下流式鉴定，看是不是还是MSC，菜鸟的一点小建议

作者: ljzmy82 时间: 2012-2-6 15:32

看起来不像是BMSC,做一下纯度鉴定吧

作者: youyue312 时间: 2012-2-6 15:42

不太像MSC，做一下纯度鉴定比较好，看增长速度比较快，有没有可能十分化了或者是变异了。很菜鸟的猜测

作者: hygene 时间: 2012-2-6 15:42

回复 wangzhihong 的帖子

谢谢，很受启发

作者: hygene 时间: 2012-2-6 15:43

回复 ljzmy82 的帖子

确实不像BMSC，可能是内皮样细胞，谢谢哈

作者: hygene 时间: 2012-2-6 15:45

回复 youyue312 的帖子
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确实不像BMSC，可能是内皮样细胞，谢谢哈

作者: redmoon 时间: 2012-2-7 08:25

仅从图片看那些细胞类似上皮细胞，而且应该是没有干细胞特性的。多向分化能力估计是极弱的。楼主可以挑两个瓶子里的做一下成脂成骨的诱导。

作者: asejon 时间: 2012-2-7 09:29

是否是杂细胞形成的克隆？考虑一下干细胞的来源，如骨髓来源或脂肪来源等，然后分析可能的杂细胞来源，与杂细胞克隆的形态进行比较看看吧。

作者: ivy叶子 时间: 2012-2-7 09:52

右边的细胞呈明显的铺路石状，与MSC形态差异很大，个人认为要用FCM重新鉴定一下，最好也能做账爬片，看看右边那种形态细胞染色结果如何，也是菜鸟的一点小建议。

作者: hygene 时间: 2012-2-7 11:14

回复 redmoon 的帖子

好的，谢谢

作者: hygene 时间: 2012-2-7 11:14

回复 ivy叶子的帖子
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好的，谢谢

作者: spchsq 时间: 2012-2-7 15:13

细胞团一定不是间充质干细胞了，可如果是内皮细胞，那为何到13代才出现，细胞看起来增殖能力还是很强的，所以会不会是变异了有恶变的可能呢，要是这样就太可怕了，期待楼主有进一步鉴定的结果

作者: lixf 时间: 2012-2-7 17:05

我曾做过小鼠的MSC，但未见过这样的形态，在原代的时候有细胞集落，但细胞形态也不是这样的。不像是BMSC

作者: zarecol 时间: 2012-2-7 17:11

你用的什么方法分离的骨髓间充质干细胞？如果是用的全骨髓法的话，可能会有其他干细胞也长起来了。如果是密度梯度离心法的可能是分化

作者: hygene 时间: 2012-2-7 21:44

回复 zarecol 的帖子
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密度梯度离心，第五代才发现长出卵圆形细胞，开始看到的时候只是几个细胞，后来逐渐增殖到几千个，形成细胞集落

作者: 漫游天龙八部 时间: 2012-2-8 00:09

看不懂，没有遇到过这种情况，关注中

作者: zarecol 时间: 2012-2-8 08:45

回复 hygene 的帖子: w6 P9 t# L y# F' N) M

是不是你用的培养液或者其他重复用的实验耗材污染了呢？

作者: hygene 时间: 2012-2-10 08:50

回复 zarecol 的帖子6 K* x; ?. f- N) w

用的一次性的实验耗材，细胞培养方面的经验是足够的，杂细胞污染的情况不存在

作者: hygene 时间: 2012-2-10 08:51

回复漫游天龙八部的帖子

谢谢关注！

作者: hygene 时间: 2012-2-10 08:54

回复 spchsq 的帖子( X, Z4 D1 ~" ^2 A* d3 `* U

谢谢关注。是第5代出现的，这种细胞又纯化出来传了13代以上，增值能力超强，2天1:3传代，培养基血清10%FBS

作者: hygene 时间: 2012-2-10 09:06

回复 asejon 的帖子

谢谢关注，很受启发。是骨髓来源的细胞。

作者: 透明之蓝 时间: 2012-2-14 16:28

内皮？？

作者: hygene 时间: 2012-2-14 21:56

回复 lixf 的帖子

谢谢回帖。我的原代也有集落的，长满后传5代细胞生长不那么旺盛了，但是过一段时间就长出这种新的细胞并逐渐形成新的卵圆形细胞集落。这种细胞集落单独传代后增殖速度很快，2天翻一番。

作者: lostris 时间: 2012-2-15 21:57

回复 hygene 的帖子0 v- y u5 ~0 i3 i5 W& O0 c5 U

我现在养的也是BMSC,P5的时候没发现有这样的细胞，我觉得可能是细胞被污染了！

作者: 雁南飞 时间: 2012-2-16 14:26

卵石样，疑似内皮细胞啊。支持做流式鉴定一下。

作者: hygene 时间: 2012-2-16 21:23

本帖最后由 hygene 于 2012-2-16 21:24 编辑 7 A& d! _. T6 z4 O$ L$ a2 H

回复 lostris 的帖子
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谢谢回帖。我们养BMSC也只是这次遇到这样的情况，细胞污染的情况可以排除，因为之前纯度做过鉴定，而且这批只培养了一种细胞。再帮忙想想会有其他原因不？

作者: hygene 时间: 2012-2-16 21:24

回复雁南飞的帖子
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感谢回帖。

作者: ljj0558 时间: 2012-2-17 10:59

问：你们培养细胞时添加细胞因子没？如果有浓度合适吗？
我以前试过用EGF和FGF诱导MSCs向内皮细胞分化，成功过

作者: hygene 时间: 2012-2-17 22:21

回复 ljj0558 的帖子$ r2 G3 ~' `8 u$ c9 q; v- e3 `) `! ^

谢谢回帖。没有添加细胞因子，但是有过特殊处理。有没有相关文献可以传阅一下，谢谢。

作者: hygene 时间: 2012-2-17 22:26

本帖最后由 hygene 于 2012-2-17 22:27 编辑

“非常感谢各位同行的热心回帖。本帖的目的是希望各位遇到此种现象的同行谈谈出现这种情况有何科学研究意义，或者如何进行下一步深入研究，或者传阅交流类似报道现象的文献。”) |; D$ \% H" @4 B% O5 `4 `
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恳请海洋版主将此段文字移到1楼贴中，谢谢！

作者: 细胞海洋 时间: 2012-2-18 00:24

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已经修改

作者: hygene 时间: 2012-2-18 11:06

回复细胞海洋的帖子
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谢谢海洋超级斑竹

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