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标题: 我传的神经干细胞到3代就传不下去啦!出现小块!求原因,经验!方法! [打印本页]

作者: Tim    时间: 2012-2-23 22:58     标题: 我传的神经干细胞到3代就传不下去啦!出现小块!求原因,经验!方法!

我传的神经干细胞到3代就传不下去啦!出现小块!求原因,经验!方法!
作者: guosapphire    时间: 2012-2-24 03:00

无图无真相啊
作者: dianying    时间: 2012-2-24 09:36

回复 Tim 的帖子
6 A$ Y6 Y* Q& I$ C% I* I. N
" @; ]* R+ o; g, w0 K是动物的还是人的?
作者: huoyan2006    时间: 2012-2-24 10:36

楼主可以将出现的问题拍个照片传上来,大家好帮你分析啊
作者: Tim    时间: 2012-2-24 11:49

回复 Tim 的帖子& z+ m8 B3 h9 {8 U  E
+ i; O0 ]% d' [% y
相机最近有问题!拍不了!
作者: Tim    时间: 2012-2-24 11:50

回复 dianying 的帖子
4 A* e  ~% ~) r! y; j6 K# F" ~3 ?
人的!图片因为相机有问题!没法照!
作者: Tim    时间: 2012-2-24 11:51

回复 huoyan2006 的帖子
; N1 ^1 f5 v4 ~" [" ^8 k  u# ^" D! D0 m1 O+ S* |  {" g) m. j9 N
谢谢啊!相机有问题!拍不了!给我的感觉好像是细胞密度太大!都聚起来了!
作者: dianying    时间: 2012-2-24 13:33

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6 T/ G6 X  n5 b6 f* V: x& @! y3 y" H! B5 [
你用的是什么培养液和培养基?用什么消化的?
作者: jj2570782    时间: 2012-2-24 14:10

lz应该描述的清楚些 没图片别人确实不好分析啊
2 v2 S) W- m% R4 o2 O) y6 m神经干细胞是圆形的团聚才正常 别的现状的团聚就要小心了,$ y- r! k1 o# e0 R$ \7 g% K$ N
密度大也同样会形成神经球的
作者: Tim    时间: 2012-2-24 15:22

回复 dianying 的帖子* K# X6 m9 x- _

* p% z0 _! e. ~; C干细胞液!聚乙烯的培养基!机械吹打成细胞悬液!包板就养!
作者: Tim    时间: 2012-2-24 15:26

回复 jj2570782 的帖子( s8 ]0 c4 [+ `9 `$ b& O2 `
( s/ ~# t1 A- e6 F
可以分享一下你的操作经验不!图片目前没法上传!相机有问题!!细胞块白色的!
作者: Tim    时间: 2012-2-24 15:56

回复 dianying 的帖子! \: |% U+ g* h: m8 m; y
# r7 f& o. v' G2 D# L: x
DMEM/F12培养基(Gibco公司)
作者: dianying    时间: 2012-2-25 08:19

回复 Tim 的帖子" ]& [3 d% P6 z; _* u/ y6 f; T. K

3 a7 p% m6 o; j: r培养干细胞的液有很多种。你的DMEM/F12液中有没有glutamine?
! j8 x1 S7 f7 K8 L3 t加没加细胞生长因子?
作者: haibara007007    时间: 2012-2-25 20:56

无图无真相,楼主最好把图发上来,大家才能知道怎么回事
作者: Tim    时间: 2012-2-25 21:34

回复 haibara007007 的帖子8 U% N1 ^" W9 h  ~5 u$ B

3 W/ {. m5 P, C& I+ j3 n加了BSA  B27  EGF  FGF  LIF  N2  就这些因子!
作者: Tim    时间: 2012-2-25 21:36

回复 dianying 的帖子) |! m! H. Q8 r2 m
5 e1 _9 J. [. o; N
加了BSA  B27  EGF  FGF  LIF  N2  就这些因子!
作者: dianying    时间: 2012-2-26 05:37

回复 Tim 的帖子
6 W: i" b6 B. F6 `# k* M( J3 X) j/ C% t8 c2 D
为什么要加BSA?% |$ y+ A% s1 V4 x% s
如果你想往胶质细胞上诱导加FBS还有几分道理。
作者: caiwwcom    时间: 2012-2-26 19:54

本帖最后由 caiwwcom 于 2012-2-26 19:54 编辑
* O2 D% Y- O: v% M
' Y1 z, r' G3 I3 ?! f回复 dianying 的帖子9 \4 K6 E0 ?6 ^
. D' U1 x* F8 j8 Z' {6 J/ v0 N0 u
一般来说  做诱导分化都不加血清,但楼主为什么加牛血清白蛋白也不得而知
作者: dianying    时间: 2012-2-27 09:54

回复 caiwwcom 的帖子0 s6 r5 r1 t8 x1 B) `

! D5 M6 o* g" r: h; s我看的文章说:到有70-80%胶质细胞时可以开始加FBS. 可以不是必须。
; t( L/ G/ P" F& K$ x
作者: caiwwcom    时间: 2012-2-27 16:54

回复 dianying 的帖子) N" {0 H! g7 j* s' H$ w/ o- S
3 u+ H( B4 B( s# i. n1 K7 F
那种应该属于培养阶段了吧 不是诱导
作者: Tim    时间: 2012-2-27 22:21

回复 caiwwcom 的帖子
& y/ H+ q' C4 g3 U* ?6 B$ ?; J/ N; v$ m
我养的是混合细胞!不是纯的神经干细胞!
作者: dianying    时间: 2012-2-28 11:22

回复 caiwwcom 的帖子
, i$ R: L- ^& ?
( d" u+ v' ^8 n$ C8 a- e6 S9 _没明白!70-80%还有成熟不成熟一说,加LIF不就是促使它们成熟吗?!胶质细胞是逐渐诱导培养出来的。
3 C& J: K" O) w; h* F我也是新手




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