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标题: 成骨诱导后茜素红染色是否成功 [打印本页]

作者: 不苦的药 时间: 2012-2-27 21:23 标题: 成骨诱导后茜素红染色是否成功

成骨诱导后茜素红染色
阴性对照[attach]39409[/attach]
诱导组[attach]39411[/attach][attach]39410[/attach]/ Y6 l2 c }. `/ q9 [7 c
我的钙结节怎么不红啊，染色是否成功，谢谢

作者: sarah19860420 时间: 2012-2-27 22:27

很明显没成功啊，阴性和阳性对照是一样的，茜素红染色会呈现很明显的红色的。你也可以用VON KOSSA再次证明下，不过个人觉得茜素红的灵敏度比VON KOSSA的高

作者: 不苦的药 时间: 2012-2-27 23:49

颜色染不上去，不知为啥，你有染色的图片吗，发一张看看，谢了

作者: wangzhiqi86 时间: 2012-2-28 08:03

做个I型胶原和ALP的RT-PCR看看

作者: xiaopingzeng318 时间: 2012-2-28 09:27

完全没有红色钙结节，染色不成功，你看成骨诱导液是不是存放时间过久可能失效

作者: xiaopingzeng318 时间: 2012-2-28 09:29

作者: xiaopingzeng318 时间: 2012-2-28 09:31

[attach]39436[/attach]

作者: 不苦的药 时间: 2012-2-28 21:01

回复 xiaopingzeng318 的帖子' e! F1 G2 G# M4 f

谢谢，你染色用的茜素红浓度是多少，PH是多少，你用的是甲醛固定的吗？非常感谢

作者: owenlion 时间: 2012-2-28 22:21

我用的是Invitrogen的成骨诱导液，一般3天后就能观察到细胞表面有钙物质沉积，有泥沙样的物质逐渐覆盖在细胞表面，后面越来越明显。你最后一个图是钙结节还是细胞聚集形成的岛？

作者: 不苦的药 时间: 2012-2-28 22:25

回复 owenlion 的帖子3 s+ d' o1 ~* f# f5 p" p- d, Y

是钙结节，不是细胞，你遇到这种状况了吗

作者: sarah19860420 时间: 2012-2-29 06:10

回复不苦的药的帖子3 H5 k6 b2 y* W0 u* l
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作者: xiaopingzeng318 时间: 2012-2-29 14:03

回复 owenlion 的帖子+ L C7 H+ }5 s2 Z b9 O1 C

诱导液也是invitrogen，直接看没染色的细胞细胞不是很明显，泥沙一样的我看不到，有过污染的是有黑点，或者有时细胞团看起来像钙结节，但是染色出来反而没结果。一般诱导后14-21天染色，诱导3-4天一换液。图是钙结节形成。而且成骨诱导的好，很多都会一片大红的。细胞聚集的话会是很立体很厚的感觉

作者: owenlion 时间: 2012-3-1 18:45

本帖最后由 owenlion 于 2012-3-1 18:56 编辑
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102883465回复不苦的药的帖子 Z& ]) x1 K0 N
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不好上传图片

作者: Athon 时间: 2012-3-3 11:24

很明显没成功，注意染液的ph值，应该在4.1-4.4之间，这很关键。最好新鲜配制，且调节ph值时要用amine

作者: 不苦的药 时间: 2012-3-3 11:27

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xiexie,你用的是茜素红还是茜素红S 啊

作者: Athon 时间: 2012-3-3 11:30

回复不苦的药的帖子

茜素红S

作者: Athon 时间: 2012-3-3 11:31

不客气1 n# S# z# Q& N! H/ p7 v2 r

作者: 不苦的药 时间: 2012-3-3 11:36

回复 Athon 的帖子' H( m) F' _7 g3 e

他和茜素红有区别吗

作者: 愤怒的小鸟 时间: 2012-3-4 11:18

楼主，现在地塞米松不是限制进口了吗？你用的成骨诱导液是怎么配的啊，有什么可以代替地塞米松吗？

作者: 不苦的药 时间: 2012-3-4 17:06

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这个不不太清出，诱导液成分是号以前买的

作者: sijiefeifei 时间: 2012-9-20 15:37

我觉得科能是茜素红PH的问题吧

作者: firstaider 时间: 2012-9-25 00:54

明显没有被染色，染色成功的话局部的红色很明显的

作者: huajie881026 时间: 2012-10-1 16:11

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请教您的成骨诱导分化所谓的泥沙样物质是这样的吗？; A/ N d5 k1 E& \/ u- n
[attach]46394[/attach]

作者: hybaoyu 时间: 2012-10-2 16:06

请问你们的苏茜红S是sigma的吗？具体怎么配呢？怎么调节PH值呢？我是小白一个，希望各位高手指点一下？

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