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标题: 神经干细胞RT-PCR怎么选择标志物 [打印本页]

作者: caiwwcom    时间: 2012-3-4 20:16     标题: 神经干细胞RT-PCR怎么选择标志物

我想做神经干细胞的RTPCR,但是查不到nestin的序列,希望有这方面文献的前辈能够分享下;另外问一下这个除了选择nestin的是不是还可以选择别的标志物做,是不是做一种就可以,谢谢
作者: jessewill    时间: 2012-3-4 21:53

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  F3 d  K8 o& r/ C; T1 u. Y9 e  ^9 H5 I- d& ^
为什么查不到Nestin的序列???NCBI或者Ensembl上面都有啊,注意选择mouse或者rat的就好啊,很简单的。* o2 c  K9 |% H: U- m
如果鉴定NSC,Nestin肯定是要的,然后根据你研究的东西,选择其他的marker or control啊
作者: caiwwcom    时间: 2012-3-5 09:08

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1 O  G1 a: _. {/ l4 ]5 j$ B6 H
$ b: k4 ?1 l) G* o3 @, v9 [" n那请问是不是就是在文献里查,没有特殊的地方吧?
( m6 L' v  `% G5 y$ C. ~  }( x. y还有我做小鼠的nestin基因,查大鼠的行不行,不知道有没有差别?
8 W, E* q9 `# Q0 F做反转录RT-PCR,文献很多实时定量RTPCR,不知道引物是否通用
作者: goodboy    时间: 2012-3-5 09:09

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1 d) v' R* k' ~* h+ n4 X7 C& y% q1 ?
其他的比如SOx2、notch.cd133等
作者: caiwwcom    时间: 2012-3-5 10:00

回复 goodboy 的帖子0 K8 z2 K: l, M/ q, E$ F# p! `! S
; {$ D, a( S: y. j
顺便问一下,做神经干细胞标志物是不是随机选择三个常用的就ok了,我打算选择nestin,sox2,Musashi1
作者: goodboy    时间: 2012-3-5 10:53

回复 caiwwcom 的帖子) ]% J' J+ |6 @8 T* M2 D
. o5 l9 {8 T( i* E. ~9 n# v1 l
这个我就不清楚了,这方面的文章看得比较少,之前看到有人做干细胞筛选用流式的方法筛三个marker就可以了% M( i+ v1 @2 f) P& i7 q

作者: yaling97    时间: 2012-3-10 00:25

pcr也要做三个标志物吗?
作者: yuye3000    时间: 2012-3-15 13:51

神经干细胞的标志鉴定要看你研究的是运动神经,还是感觉神经,还是中枢神经。
$ H- b: Z3 q( }. e/ p% G6 ~% c/ @; s根据神经不一样,选择的鉴定物也不一样,比如Nestin, b-tubulin, GFAP等,有专门鉴定轴突的,还有鉴定髓鞘的,神经元的,等……
作者: leozarah    时间: 2012-3-16 11:19

鉴定神经干细胞,一般用nestin和mash-1共标呀。楼主可以试一试,这些在NCBI上都可以查的到序列的。
作者: caiwwcom    时间: 2012-3-16 14:26

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- T9 C& P( b2 {$ P. r5 m- Z# ?+ q) J. X8 C/ E9 [
ok 打算两个都做pcr




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