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标题: 培养基颜色怎么变那么快？ [打印本页]

作者: 冰枫de梦 时间: 2012-3-12 19:52 标题: 培养基颜色怎么变那么快？

DMEM/F12培养基换液后一天后颜色就变成了黄色了，怎么回事啊。配制培养基时PH也是调了的，原来是深红色，培养细胞一天后就变成黄色了，怎么变酸那么快啊。细胞生长的还可以，求高手指点

作者: mansnoopy 时间: 2012-3-12 22:19

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首先培养基变黄不一定是变酸。根据的我经验培养基变黄有一下几种可能，1，存在污染，2，细胞消耗过大

作者: BDFCM 时间: 2012-3-12 22:33

Gibco的DMEM/F12培养基本身颜色就不深，养hES的话，加进去的KOSR更是使其变黄，换液一天之后颜色无显著变化，这样是正常的。
你这种情况的话，培液你是调过PH的，变黄原因可能有：- [: ~8 e( a0 s+ F1 K9 P
1) 培养箱二氧化碳浓度所产生的酸碱度，正好使该培液呈现你所看到的黄色
2) 你细胞太密了
3）支原体大爆发，检测一下吧

作者: 牙牙丫丫123 时间: 2012-3-13 09:24

一般的情况是因为细胞生长营养代谢过快，而且饲养层也是一个主要的消耗源；另外，也有可能是染菌，如果看不到明显的杆菌或者真菌的污染，可能就要想一想是不是支原体的污染。还有，如果你不介意的话，是不是可以将配方传上来看一看什么成分可能导致这个原因。

作者: 不倒翁 时间: 2012-3-13 10:38

细胞太密了就会变得特别快染菌的话好像是变成紫红色哦

作者: shuixiao 时间: 2012-3-13 11:07

你培养基是用粉末配置的，还是买的现成的？如果是配置的话，有没有加两性缓冲剂hepes？2 x) P0 W$ [9 W' G% ~/ k- ?
hepes在PH7左右时缓冲能力极强，有助于稳定培养液的PH，我们这配培养液时都会按比例加入hepes的。如果是买的商品化的液体培养液，其中应该含有hepes，那就要查找其他的原因了。

作者: yyshpy 时间: 2012-3-13 11:51

回忆一下，配培养基的时候要加NaHCO3粉末，一定要按标准加足量，然后适当使用NaHCO3溶液调节PH值，有的实验室还加上HEPEs缓冲盐，这样培养细胞时，溶液的颜色不会变化很剧烈，如果没有加NaHCO3粉末，直接调的ph值，培养液颜色变化就会很剧烈，这个情况我以前也遇到过，并不是污染了

作者: yyshpy 时间: 2012-3-13 11:52

而且，本身，培养液在空气或者CO2环境下，放置一段时间，颜色就会变化，PH也会稍有变化，但是变化很剧烈，很快得话，就说明缓冲能力很差了

作者: yanlu98 时间: 2012-3-13 12:23

有可能是培养箱的问题，你可以找厂家的人用专业测二氧化碳浓度的仪器测一下，以前我也遇到过着这样的情况，虽然自己调的浓度是5%，但是一测结果是8%。

作者: crazytime 时间: 2012-3-13 23:22

是明黄色么？

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