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标题: 求助：小鼠胚胎问题 [打印本页]

作者: lhw7514093 时间: 2012-3-16 11:19 标题: 求助：小鼠胚胎问题

求助大侠们：我冲出的囊胚没有头明带。应该是在母鼠体内就把透明带丢了，这是怎么回事啊？是缺什么东西还是？谁碰到过这种情况啊？
谢谢指教

作者: mansnoopy 时间: 2012-3-16 11:46

回复 lhw7514093 的帖子; V$ ]3 Y* j9 i) F/ L
! k& w' w7 i2 c+ R4 c. d, K
发张图看看

作者: redmaple 时间: 2012-3-17 15:36

具体过程能讲一下么？

作者: zpzp0312 时间: 2012-3-21 10:46

提前冲胚胎; n/ x M$ W( W8 {4 w
建议在3.5dpc上午冲; V; A$ b5 S; O6 @* B
如果冲晚了，有些囊胚会孵化出来
你可以在收集囊胚时看看收集到的液体，里面应该有空透明带

作者: lhw7514093 时间: 2012-3-29 16:03

回复 zpzp0312 的帖子9 l' Q( V5 ]3 V: x( j
: e3 R; C0 ]7 f @: [9 K
不是孵出了，一起冲出来的桑葚和8-cell也有没有透明带的，而且我冲的时间不晚，不知道是怎么回事

作者: lhw7514093 时间: 2012-3-29 16:09

回复 redmaple 的帖子' d! D; Y, S9 ?. ]
2 ]# L/ J' B$ j5 `5 Z, _
就是冲囊胚期的胚胎时冲出好多没有透明带的囊胚，桑葚，还有8-cell。6 p& O. E. C1 A4 v, Q, |
我们是做的超排：# p; W( F3 ?3 {) y/ `+ D8 ?! [/ I
第一天14:00注射sigma的PMSG5IU，第三天13:00注射sigma的HCG，然后合笼，第四天检栓，见栓的饲养，第7天早起冲胚胎，收集囊胚。

作者: lhw7514093 时间: 2012-3-29 16:11

回复 mansnoopy 的帖子* A& l* W3 q" y) ]( T h; A

没有照相，2 S0 l* [1 q% F- D1 F6 h- U
正常的胚胎应该是有聚堆的现象，没有透明带的很黏，基本是你怎么放到微滴里的就粘到哪了，不会自己聚到一堆去。

作者: zpzp0312 时间: 2012-3-30 17:15

本帖最后由 zpzp0312 于 2012-3-30 17:17 编辑

那就是小鼠品系的原因了% ]' h1 [. a( |" l4 H5 Q
你用的一定不是ICR，129这样的大众品系
有些品系的小鼠胚胎质量较差，容易出现早期透明带消失的现象
当然，ICR这样的品系也会出现这样的情况，但较少见

另外6 Z8 k9 [3 i! T: v3 a
你的小鼠品系是什么？' E. n9 T7 N' A
小鼠多少日龄开始超排的？

作者: lhw7514093 时间: 2012-3-30 17:20

回复 zpzp0312 的帖子
7 x: E- V0 B& S! j# t# W2 K r
B6，三周进行超排

作者: zpzp0312 时间: 2012-3-31 13:37

回复 lhw7514093 的帖子

改到4周# ~4 z1 J/ A8 q, |$ B- E2 h% W" [
激素剂量可以适当降低

作者: lhw7514093 时间: 2012-4-2 19:22

回复 zpzp0312 的帖子( @. J" [; \' v6 M9 m5 C; P

再请教一个问题，注射激素是挑那些发情的老鼠还是挑那些不发情的老鼠啊？

作者: zpzp0312 时间: 2012-4-5 21:14

一般是随机挑取
基本见栓率能达到80%甚至更高

作者: wwwsdzsgov 时间: 2012-4-12 07:02

本帖最后由 wwwsdzsgov 于 2012-4-12 07:06 编辑

会不会冲的力量太大, B8 P% M! \+ I- a( ~' r5 ^( Y9 Q
我曾经遇到过这样的情况，有个新手冲羊的胚胎，结果只有透明带（破裂的），没有囊胚。
另外，如果8细胞和囊胚同时出现，这种情况也不正常。% h: e7 M1 H' y% a- F* ]
小鼠体重应控制在25g左右，激素5ui1 G7 Q; P0 \- b+ G
光周期也很重要% `0 L. C& w6 \/ J7 L6 r9 G4 V, p9 w
我曾经做过小鼠，做了一周才发现小鼠房里是24小时光照，冲子宫什么都没有，冲输卵管一堆东西，从2cell到囊胚都有，说明生物钟紊乱会造成宫外孕。
题外话，就是想说明光周期很重要。

作者: lhw7514093 时间: 2012-4-12 15:24

回复 wwwsdzsgov 的帖子$ j2 ^) ?6 ^+ {* J& s1 }7 f

我们是按照文献上说的三周大的做的，回头我们试试大点周龄的，估计不是冲的力度大的问题，因为都是同一个人一只操作，搞不懂是什么原因，光周期我们是固定的12小时对12小时，应该没什么问题吧

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