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标题: 间充质干细胞在传代消化时用EDTA胰酶效果好还是用胰酶不加EDTA的好? [打印本页]

作者: yingjie 时间: 2012-3-29 15:25 标题: 间充质干细胞在传代消化时用EDTA胰酶效果好还是用胰酶不加EDTA的好?

本帖最后由细胞海洋于 2012-3-30 00:55 编辑 7 O# P `5 ^- l1 l
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间充质干细胞在传代消化时用EDTA胰酶效果好还是用胰酶不加EDTA的好?知道其中原理的帮忙分析下，谢谢

作者: zhj1988 时间: 2012-3-29 16:03

加EDTA效果好点，EDTA是Ca离子螯合剂，促进细胞脱壁，消化效果还可以。

作者: Demon_CN 时间: 2012-3-29 16:06

加EDTA好,2价离子会抑制酶的活性，EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子。加了可以保证酶的活性

作者: yingjie 时间: 2012-3-30 10:29

回复 zhj1988 的帖子

加了EDTA会不会对细胞产生不良影响呢？

作者: zhj1988 时间: 2012-3-30 12:47

回复 yingjie 的帖子' [! O H4 D: i5 y7 M9 ]1 P4 [

影响肯定有的，但是你可以用血清终止消化然后离心去除就没事了，我是这样用的，细胞状态还好。8 @5 j' `# z e- @5 ~2 Q/ t

作者: Tim 时间: 2012-3-30 15:42

建议合用！我用的就是混合的感觉效果很好！胰酶对蛋白质有水解作用主要作用于赖氨酸或精氨酸相连接的肽键！使细胞间质中的蛋白质水解使细胞分开！EDTA能与细胞上的钙镁离子结合形成螯合物，利用结合后的机械力使细胞变圆分散细胞或使贴壁细胞从瓶壁上脱离，缺点是细胞容易裂解或贴壁细胞从瓶壁上脱离是呈片状！ |9 s; ]3 }! F8 O, o
胰酶和EDTA混合使用（1：1或1：2），有利于细胞的脱壁和分散！还可降低胰酶的用量和毒性！

作者: 快乐成长 时间: 2012-3-30 16:54

一般的胰酶成品都含0.05%的EDTA,效果可以。

作者: 心蕾 时间: 2012-3-30 17:02

我们用的是0.25%的胰酶和0.05%EDTA的混合物，效果挺好的。上学的时候有一次配胰酶忘了加EDTA，细胞很难消化下来。

作者: yingjie 时间: 2012-3-31 14:19

谢谢了，朋友们" g7 f7 d* T' V+ T0 P+ X( r

作者: ditiger 时间: 2012-4-5 18:57

还是加的好，MSC高度表达CD44，等黏附分子，EDTA是钙离子螯合剂，有利于吹散细胞，当然，如果是临床的话，慎重加。

作者: 筱筠 时间: 2018-4-11 17:26

0.25%的胰酶和0.05%EDTA的混合物

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