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标题: feeder铺稀了消化下来重新铺可以吗 [打印本页]

作者: 573639471 时间: 2012-4-21 15:47 标题: feeder铺稀了消化下来重新铺可以吗

RT 铺了1个六孔板，过夜贴壁后发现细胞有些聚集，怀疑是消化后没有吹散，密度有点小，如果消化后6个孔合成三个可以吗

作者: ly200101042 时间: 2012-4-21 16:23

呵呵我也好奇这个问题啊

作者: yuhaoze 时间: 2012-4-21 20:40

必须可以吧，这有什么不行的

作者: 懵懂干细胞 时间: 2012-4-21 22:23

影响肯定是有的，不过一般我们不会这样去省feeder细胞的，除非特殊情况可以考虑这样去做！

作者: huangcong1988 时间: 2012-4-22 10:04

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除了用MEF，您试过用其它种类的细胞做饲养层吗？还有就是除了看干细胞培养状态外，您怎样鉴定饲养层效果？

作者: 573639471 时间: 2012-4-22 17:38

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试过无feeder，没有试过其他细胞类型，有其他的吗
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除了看干细胞的状态，还看feeder的状态，其他暂时也没有

作者: huangcong1988 时间: 2012-4-23 09:31

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feeder的状态怎么看呢？只看细胞液变色没？还是其它方面的显著特征？能肉眼观察么？

作者: 南宫燚岚 时间: 2012-4-23 13:07

不建议消化下来重新铺，反倒可以解冻一些再铺到同一孔中

作者: myrudy 时间: 2012-4-23 14:51

如果MEF的状态还可以的话消化下来再铺的话问题应该不大

作者: 573639471 时间: 2012-4-23 17:39

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我主要是看细胞的形态，梭形或三角形，增殖速度较快，一般2-3天传一次，里面的黑色渣子的多少。黑色物很多人说是细胞代谢物，我养的里面挺多的，一直都没有很好的解决，特别是灭活后的细胞。

作者: 573639471 时间: 2012-4-23 17:41

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有根据还是有经验？
能告诉我为什么吗

作者: huangcong1988 时间: 2012-4-23 18:11

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feeder还能再增殖？饲养层还能传代么？feeder不是不能增殖么？黑色渣滓多的话是挺烦的，在制作饲养层之前细胞里面就有不少，完了制成饲养层之后，里面黑点反倒少了

作者: frankieisme 时间: 2012-4-23 23:54

我用过ACTT的SNL细胞,不特适合iPS的feeder,最好的还是MEF,只要没有用丝裂霉素C处理过,重新消化铺板应该是没有问题,如果处理了最好还是不要用了.

作者: 南宫燚岚 时间: 2012-4-24 11:02

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之前这样做过，效果不错，算是经验吧

作者: chentian820 时间: 2012-4-24 12:28

有gelatin，不好消化吧！

作者: wangyimei 时间: 2012-8-19 09:07

不需要消化下来，根据目前饲养层细胞的量，看看大概还需要补充多少，再复苏一下直接往上面补充所需的细胞量即可

作者: 也行天下 时间: 2012-8-20 06:44

铺稀了，再复苏一管补铺一下应该更方便一些。对细胞状态也没有什么影响。我觉得如果铺密了的话，可以试试消化下来重新铺。

作者: chenks 时间: 2012-9-8 22:18

我觉得消化下来再种可能不太好;我一般都在孔里补种一些feeder的

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