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标题: 求解：做个PCR水里边老老是P出东西? [打印本页]

作者: think 时间: 2012-4-24 13:37 标题: 求解：做个PCR水里边老老是P出东西?

最近不知道怎么回事？做个PCR老是P出东西来已经很小心了就是严格实验操作尽可能避免污染机会可是还是出来东西！！7 H3 R, t4 m: m
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难道是其中某个试剂如水，或者引物等... 求解！！~~ 谢谢

作者: arniekyo 时间: 2012-4-24 13:50

建议您将引物，buffer，酶等PCR试剂都用新的做一次

作者: genedu 时间: 2012-4-24 15:14

是酶的问题，假如您用的是国产的酶，它有可能是在具有一定抗性的大肠杆菌中提取的，那你的酶中也就含有这个东东，当你不幸要P这个片段时，悲剧就发上了

作者: ouyi2738 时间: 2012-4-24 17:07

引物，buffer，dNTP，mg2+，水都有可能被污染，想找原因就一个一个试吧，不想找就全换新的。

作者: linzi214 时间: 2012-4-25 09:39

我们这边也有人从水里面扩出来东东，可以买天根公司的或者酶自带的DNase-/RNase-free ddH2O，如果还有东西扩出来，可以测序看是不是你要的目的条带，是的话可以回收纯化你的目的片段；不行的话更换一支新的酶，其实你操作这么小心的话，酶和buffer应该不会被污染的。

作者: chentian820 时间: 2012-4-25 16:21

我以前也碰到过。我们实验室是做病毒的，有一段时间我从水里也能p出条带。
我就换了一个实验室，然后用别人的水，就好了。

作者: think 时间: 2012-4-25 21:54

回复 chentian820 的帖子( K5 A0 |+ q! {' D6 z3 h& Z

en 确实是气溶胶的问题换了间实验室再做好了谢谢提供建议

作者: think 时间: 2012-4-25 21:55

回复 linzi214 的帖子3 V% P; r6 g' Q) u( R7 A S
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嗯谢谢提供宝贵建议非常感谢

作者: think 时间: 2012-4-25 21:55

回复 arniekyo 的帖子

嗯是气溶胶的缘故它造成了污染

作者: think 时间: 2012-4-25 21:56

回复 arniekyo 的帖子
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Thank you ! 找到问题症结了谢谢

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