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标题: 谁能提供下细胞的proliferation和Doubling time和colony formation的实验protocol [打印本页]

作者: sarah19860420 时间: 2012-5-1 03:25 标题: 谁能提供下细胞的proliferation和Doubling time和colony formation的实验protocol

本帖最后由细胞海洋于 2012-5-2 01:37 编辑

谁能提供下细胞的proliferation和Doubling time和colony formation的实验protocol。Proliferation想要那种经典的试验方法。不是MTT的。如果没有，MTT的也可以。谢谢~~

作者: DNA 时间: 2012-5-1 15:48

Proliferation经典的试验方法是指SRB法吗？

作者: DNA 时间: 2012-5-1 15:57

Soft_Agar_Colony_Formation.pdf (5.79 KB)

附件: Soft_Agar_Colony_Formation.pdf (2012-5-1 15:56, 5.79 KB) / 下载次数 20
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=NDE2MTZ8NDc4MTBjMzl8MTc0ODkwMjg4MHww

作者: sarah19860420 时间: 2012-5-1 23:50

回复 DNA 的帖子

我看了一下，这个SRB法是不是关于悬浮细胞colony形成的经典实验呢。我不是很了解。实验室的老师说计数法就是计算细胞增殖的经典方法。但是我没有查明白具体怎么操作，怎么计算。不知您是否有相关的步骤呢。谢谢

作者: laurel101 时间: 2012-5-2 13:09

本帖最后由细胞海洋于 2012-5-3 00:09 编辑
* B& W. e* H$ A! M- q; v- d0 N" Z
回复 sarah19860420 的帖子! Z# N# E+ X& E

前不久刚做过生长曲线，做法仅供参考。
1.取生长良好细胞，消化，用新培养基制成细胞悬液后计数。2．铺板，6孔板的话，根据细胞增殖快慢可取2万左右细胞每孔，每孔需要三个复孔，测7天，即需要铺21孔。同时测2株细胞的话就可以共铺7块6孔板，每天取出一块计数。　3．24 h后开始计数，每次消化3孔细胞，以后每隔24 h计数一次，计算平均值。连续计数7 d。　　4．根据细胞计数结果，以单位细胞数为纵坐标，以时间为横坐标绘制生长曲线。Doubling Time公式:DT=t*[lg(2/(lgNt-lgNo))] No：起始细胞浓度；Nt：最终细胞浓度；t：培养时间。起始细胞浓度以即将进入对数生长期时浓度为准，培养时间也是即将进入对数生长期后培养的时间。

作者: huangcong1988 时间: 2012-5-2 14:41

回复 laurel101 的帖子
3 E; C1 F( {/ ~. y% a, w
能具体解释一下那个doubling time 的公式么？谢谢

作者: sarah19860420 时间: 2012-5-4 03:56

回复 laurel101 的帖子
1 |$ q" p1 m$ [" D- I, S9 E) O9 ?
谢谢

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