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标题: 【请教】请问CIK培养时换液的依据 [打印本页]

作者: zhenhuale 时间: 2012-5-19 08:59 标题: 【请教】请问CIK培养时换液的依据

请问在CIK培养的过程中，什么时间点加液？是半量换液好还是补液好？补液补多少量，依据是什么？什么时候是扩瓶的最佳时刻？
请各位帮忙解答，不胜感谢！

作者: 大少爷 时间: 2012-5-19 09:49

在CIK培养的过程中，第三天或四天如果细胞状态差，集落少，杂质多，可半量换液。状态好，加等量培养基，补充rhIL-2。第六天或七天，计数，然，调整细胞浓度始终为（1-2）×106/ml，加适量培养基。第八天或九天计数，调整细胞浓度始终为（1-2）×106/ml，加适量培养基。后面也是这样加。。6 |1 U# M" b8 C+ k

作者: zhenhuale 时间: 2012-5-19 09:54

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感谢您的回复，很有用

作者: 痞子的烟头 时间: 2012-5-19 14:56

CIK细胞在第五天时补液扩瓶就好了，

作者: 星夜倩儿 时间: 2012-7-5 17:26

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你好，请问，6、7天之后换液是就不需要补加IL-2了吗？IFN-r（第一天添加）、anti-CD3、IL-1添加后，以后换液时还需不需要再添加？

作者: 大少爷 时间: 2012-7-5 18:49

6、7天之后换液时需要补加IL-2，其他的不用加。

作者: zuming 时间: 2012-7-5 18:52

我们只补液，不换液，补液同时补IL-2

作者: 细胞海洋 时间: 2012-7-5 23:47

回复星夜倩儿的帖子8 B% s+ E2 N/ T+ W( ]& Y
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看6楼

作者: 113305060 时间: 2012-7-6 08:47

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3 b; p8 C2 L$ I' u6 g" D* o; b2 ~
请问一下只补液，不换液的话，那不是里面培养液太多了啊，请问一下几天补液一次，要补液多少次才传代，谢谢

作者: 星夜倩儿 时间: 2012-7-6 09:05

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2 ~0 [0 u) W; |. R1 e
谢谢，我们刚开始养，还有很多不明白的地方，请多多指教

作者: zuming 时间: 2012-7-6 16:14

回复 113305060 的帖子) p# A4 Q O0 x. f. }) R

最后是在培养袋中培养的，可以装1600-2000ml培养基呢。

作者: yanlu98 时间: 2012-7-6 16:15

培养过程中不换液，一般2-3天等量补液，不过这也要根据细胞的生长具体情况来定，我是一般看到培养基颜色明显变黄，镜下形成较多细胞团就补液了，除了第2天补充各种细胞因子外，我们培养后期的补液都是补含有IL-2的完全培养基（含双抗，FBS的1640）.

作者: yanlu98 时间: 2012-7-6 16:38

培养过程中不换液，一般2-3天等量补液，不过这也要根据细胞的生长具体情况来定，我是一般看到培养基颜色明显变黄，镜下形成较多细胞团就补液了，除了第2天补充各种细胞因子外，我们培养后期的补液都是补含有IL-2的完全培养基（含双抗，FBS的1640）.

作者: yanlu98 时间: 2012-7-6 16:40

培养过程中不换液，一般2-3天等量补液，不过这也要根据细胞的生长具体情况来定，我是一般看到培养基颜色明显变黄，镜下形成较多细胞团就补液了，除了第2天补充各种细胞因子外，我们培养后期的补液都是补含有IL-2的完全培养基（含双抗，FBS的1640）.

作者: jiefengbing 时间: 2012-7-9 16:04

细胞状态不好就半量换液，这样有利于细胞形成集落形成。我试过半量换液跟补液，感觉补液没有半量换液的细胞状态好。

作者: 113305060 时间: 2012-7-9 16:52

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6 v% n, F& o2 m
CIK换液是不是离心后半换液啊？
DC细胞在后期培养中也是悬浮状态的，是不是也是离心后半换液？谢谢

作者: jiefengbing 时间: 2012-7-9 17:50

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我是离心后半量换液的，DC第7天跟CIK混在一起了，前期就按照贴壁细胞换液方法就行了

作者: gengtongyu521 时间: 2012-7-11 10:22

补液只需加IL-2，IFN和CD3不需要再补加，细胞密度很大的时候，比如3*106/ml的时候需要扩瓶或转到培养袋中培养啦，CIK细胞增殖很快的。在细胞生长期，每次补液的时候密度调到1*106/ml。

作者: liutianhua 时间: 2012-8-15 11:05

回复 113305060 的帖子2 z; T% s4 b4 k3 t# V" l9 z2 J) s
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最后培养液就是很多

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