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标题: 大家看看我扩增的MEF是怎么回事 [打印本页]

作者: momocy 时间: 2012-5-31 08:30 标题: 大家看看我扩增的MEF是怎么回事

这个MEF是从CF-1小鼠的胚胎分离的，扩增到P3代了，培养皿里有一层类似树枝样分叉的脉络，显微镜下看到的图片是这样的。大家看看是怎么回事，是因为肝脏、四肢什么没分离干净，所以分化了么？

作者: yuhaoze 时间: 2012-5-31 08:44

细胞长得挺难过，形状都不像MEF了，我也看不出是什么东西

作者: cochongg 时间: 2012-5-31 08:58

做原代时消化没做好，背景好脏，细胞生长状态也不是很好

作者: wcfeng88 时间: 2012-5-31 09:18

感觉是消化过度，或者培养基偏酸了。如果是培养了几天的细胞，可以把它消化下来，再通过差速离心的方法把成团成带的大团细胞去掉之后，单个的细胞好好养几天传几代估计能恢复过来。

作者: pipi168 时间: 2012-5-31 10:34

ips没前途，忽悠成分多，看图片不是mef。

作者: 不倒翁 时间: 2012-5-31 11:19

脏的东西是贴壁的么有时候传细胞的时候消化过度了会看见这样的细胞团一样的东西漂着一条

作者: geneyhh 时间: 2012-5-31 13:23

感觉像上皮细胞，不知道我说的对不对。

作者: momocy 时间: 2012-5-31 13:54

回复不倒翁的帖子5 s( N: j' b# A9 n: b: q, b% c% q' [

是贴壁的

作者: ontheway_hit 时间: 2012-5-31 14:01

感觉细胞的界限不是很清楚，而且细胞长得像蝌蚪，不是MEF吧？

作者: iseeyou1210 时间: 2012-5-31 15:17

是MEF, 但是消化不好，细胞成团，长成colonies。
那些有分支的细胞可能是neuron细胞，但是太多了也不正常，传代以后会loss。" J, t) Z+ U3 Q: U
MEF一般都是分化的细胞，不存在什么分化的问题。

作者: ligangtiancai 时间: 2012-5-31 15:21

看上去像是细胞密度过大导致的卷边。。。我遇到过

作者: momocy 时间: 2012-5-31 17:12

回复 ligangtiancai 的帖子
# a5 A z* ?, o: E: y; ?: J
不像啊，我这个细胞密度不大，而且我以前细胞长的密的时候也没有卷边啊，我一直很怀疑是分化组织没有剔除干净。

作者: huangcong1988 时间: 2012-6-1 14:14

看第二张图的时候我觉得是老化了，但是才P3，不至于啊，放大倍数说明一下可能好判断一些

作者: 573639471 时间: 2012-6-1 16:35

我遇到过，有两种可能：
第一，如果是从原代开始一直有，那就很明显是未消化的组织块贴壁后形成的克隆
第二，如果是P3传代后才出现的，那么是传代的时候消化过度，细胞黏连了，又没吹散，即细胞团形成的克隆

作者: yangpan521 时间: 2012-6-4 08:54

杂细胞太多，建议分离时胎鼠去头、去尾、去四肢和去内脏。只用北部的一点点就足够了，有条件的话在300目的筛网过滤一下，效果非常好。

作者: yongchen1314 时间: 2012-6-4 17:44

MEF制备时除去不要的胎鼠组织，可以考虑培养基终止消化后静置5min，取上清离心种瓶，大的组织团块不要，细胞量是够的

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