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标题: 细胞怎么了 [打印本页]

作者: 皮搋子 时间: 2012-6-5 12:42 标题: 细胞怎么了

这是原代第三天的大鼠骨髓干细胞，为什么是这样的呢？是污染了还是怎么了？请高手指点* v$ O$ J* U9 H. U+ o
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作者: PENGMINLBX 时间: 2012-6-5 13:49

这个图我看不太清楚是多少倍镜的啊

作者: mengnancy 时间: 2012-6-5 14:47

看似污染了，污染就丢弃了，否则污染更多的细胞。

作者: 542177563 时间: 2012-6-5 15:07

先别扔！这是因为取的原代悬浮细胞多的缘故，建议再仔细看一下这些细胞的底部有没有少量贴壁细胞，一般会看到个别贴壁的细胞，形态都比较大，而且很不规则。

作者: 穿越地平线 时间: 2012-6-5 16:55

建议重新上传几张不同倍数的照片，污染高倍镜下可以看到很多游来游去的小东西，一张照片说明不了问题。

作者: zmm 时间: 2012-6-5 16:59

如果地步没有贴壁的细胞的话，还是建议你扔了

作者: 如来的观音 时间: 2012-6-5 17:52

第3天换液了没有，要是没换液，等换液了在观察。

作者: frankieisme 时间: 2012-6-5 21:12

第3天贴壁的细胞不多,再观察两天,换液去掉悬浮的血细胞,可以看到不多的贴壁细胞.

作者: yongchen1314 时间: 2012-6-5 22:20

原代的细胞没换液之前是有许多组织碎块的，但是都第3天了，MSC应该早贴壁了，如果没贴壁细胞，可以考虑再做一批

作者: sdsgliufeng1 时间: 2012-6-5 23:13

不像污染，换液之后，调好焦距，一般会发现少许贴壁细胞，慢慢养吧

作者: 皮搋子 时间: 2012-6-6 09:25

高倍镜下观察没有游来游去的东西，而且换液之后高倍镜下观察也没有贴壁细胞，养两次了都是这样，始终找不到原因，有没有人遇到过类似情况？

作者: 天枰2012 时间: 2012-6-6 11:26

看不清楚，建议换液看看吧

作者: 穿越地平线 时间: 2012-6-6 14:04

让你开开眼，刚分离的患者外周血就被污染的照片，嘿嘿

作者: 穿越地平线 时间: 2012-6-6 14:04

让大家见笑了

作者: 穿越地平线 时间: 2012-6-6 14:06

其实也挺郁闷的，因为好不容易搞到一个13y小孩的外周血标本结果接种到板上6个小时就发现细菌污染了。。。。。

作者: menghy 时间: 2012-6-6 14:28

骨髓MSC细胞分离三天后存在悬浮细胞，这个很正常。可以不用管，可以通过换液来解决，一般需要2-3次换液后才会彻底去除。
贴壁细胞一般在5-7天开始出现零星的细胞，要多观察。一般都会出现，要整个细胞瓶都观察来确定贴别的细胞。

作者: 相宜 时间: 2012-6-6 15:36

看不出来污染，像是未贴壁的细胞的形态，我以前也碰到过这种情况，建议再观察两天

作者: 细胞海洋 时间: 2012-6-7 01:24

回复穿越地平线的帖子, \5 R% X0 J6 q9 o/ h
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单个图片上传不要大于1000kb

作者: cx4236850 时间: 2012-6-7 02:36

原代细胞会有很多未贴壁的杂细胞，你这个焦距看到的都是贴壁不牢的杂细胞，分析原因可能有以下几点：- d' V8 Z3 t3 F+ ]0 p
1，焦距没调对，贴壁的MSCs不在这个层面上；0 f+ n: w$ ~) Z" t" d
2，你使用全骨髓培养法还是用percoll密度梯度离心法，如果后者你可能分离细胞没做好，MSC根本没分出来；
3，稍老点BMSCs养的时间比较久，MSC较少，要等个几天才看到有集落生成，建议你半换液每次试试；' t: @+ q# [$ p
可以适当提高点血清浓度，这对细胞营养比较好。. M# a9 [! R- m5 L0 q$ T3 I
仅供参考

作者: wind789 时间: 2012-6-7 09:05

穿越地平线发表于 2012-6-6 14:06 9 T: A$ Q0 l9 S/ D( b6 j
其实也挺郁闷的，因为好不容易搞到一个13y小孩的外周血标本结果接种到板上6个小时就发现细菌污染了。。。。 ...

你的图片呢？

作者: 欣雨1121 时间: 2012-6-7 11:32

不像是污染建议先养着换液后看看是否有贴壁细胞在做决定

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