干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 关于CIK细胞冻存 [打印本页]

作者: zhenhuale 时间: 2012-6-12 17:25 标题: 关于CIK细胞冻存

请教各位前辈，CIk细胞冻存时DMSO的浓度以及一个冻存管冻存细胞的量是多少？各位做CIK临床应用是否会将细胞冻存起来，等临床需要时再解冻使用？

作者: liutianhua 时间: 2012-6-12 17:48

不会的，cik细胞量太大了，而且冻存影响活性。

作者: 流泪的鱼 时间: 2012-6-12 20:32

任何细胞冻存都会影响活性，就是肿瘤细胞活性不受影响，但是也有少量死亡的细胞。建议不要冻！

作者: 大少爷 时间: 2012-6-12 21:51

5 t- X( \: i2 B; a3 H/ p8 F# p- ~2 ^
ＣＩＫ细胞的冻存：
细胞冻存液是由培养基和ＤＭＳＯ按照９∶１的体积比配制，与CIK细胞悬液等体积混合。
细胞最终冻存浓度是2*107每ml，你可以试试。* @7 Z/ ~! z L3 o6 |$ A" m3 L

作者: 学无止境 时间: 2012-6-13 15:27

大少爷发表于 2012-6-12 21:51
: K/ T0 w& K2 I4 q2 ZＣＩＫ细胞的冻存：) P; N8 Q- \- @. M
细胞冻存液是由培养基和ＤＭＳＯ按照９∶１的体积比配制，与CIK细胞悬液等体积混合。 ...

# H. c1 V! N" [9 l8 i
请问，冻存密度这么大，复苏时，活力能达到多少呢？

作者: 大少爷 时间: 2012-6-13 23:59

你试试看呗，我以前没测活率，复苏后细胞状态一般

作者: LL87 时间: 2012-8-20 21:20

冻存不但活性会下降，而且成本高，不划算。

作者: 鑫鑫向荣 时间: 2015-10-28 09:15

回复大少爷的帖子

请问有试过成品冻存液吗如果有，你们用的是哪家的

作者: zhengjianwei521 时间: 2015-10-28 10:39

是的，冻存太不划算乐，还不如在才一次血液呢，cik比较脆，复苏后状态一般不好

作者: 李黎 时间: 2015-10-28 13:29

1640：胎牛血清：DMSO按7:2:1来配冻存液5 p3 U2 F2 \ Z: M
密度会按2*10^7每毫升来

作者: zmfang555 时间: 2016-2-29 09:34

我们也尝试过很多方法冻存过，包括DMSO:培养基=1:9，DMSO:血清：培养基=1:1:8，添加PEG2000，还要购买现成的冻存液，发现效果都不太满意，CIK复苏时死亡率较高，得率较低，而且状态较差，不太适合临床会输。

作者: echizne 时间: 2016-2-29 14:09

回复李黎的帖子+ t6 q/ S$ u4 n+ a7 N! p

冻存后复苏状态不怎么样，而且细胞量太大，冻存成本略高

作者: zhengjianwei521 时间: 2016-3-16 11:06

建议不要冻存，如果冻的话就培养基：血浆：DMSO=5:4:1，你可以试试

作者: easternliu 时间: 2016-3-16 12:08

对于传统方案，10%DMSO，FBS和培养基共90%；一般FBS浓度越高效果越好，但是动物源性血浆存在类如牛源支原体污染的风险。

作者: gejianyun 时间: 2016-3-16 16:35

建议在单个核细胞分离后马上冻存，这样算好回输时间复苏、诱导、扩增，回输前的细胞活性可以有效保证。冻存的CIK细胞复苏后直接回输，恐怕活力和临床安全性都会下降。

作者: fjq729587158 时间: 2016-3-16 16:55

冻存不划算，成本太高。

作者: 我是传奇 时间: 2016-3-17 15:14

冻存密度要控制在10的六次方左右，不能到7次方，那样会死很多，CIK细胞正常临床上是不冻存的，因为数量太大，冻存不能用冻存管智能用干细胞领域的冻存袋，但是即使是这样恐怕也需要最大规格的冻存袋，冻存后细胞活率会受影响越大数量的冻存损失数量越多，一般在15%-30%左右，而且细胞活力或分泌功能还需要进一步检测，一般冻存后需要复苏培养在为病人回输副作用才会小一点，东存液配比可以按照楼上回复的比例更可以直接买那种品牌成包装的东存液更好一点。

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)