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标题: gFAP 染色 [打印本页]

作者: dianying    时间: 2012-6-13 09:46     标题: gFAP 染色

gFAP 染色:有没有用 BSA 封闭染色染得漂亮的,大家用PBS还是TBS呀?9 ]& _* M; |( D1 {% \; W
谢谢!
作者: Yedan    时间: 2012-6-13 10:15

我做immunostaning全是用10%FBS封闭的……
作者: dianying    时间: 2012-6-14 08:24

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$ Y' W- h& Q' K, l9 {( {2 C  F1 q! E; }2 A
谢谢你!+ X( r% R6 B+ p4 X
于我封闭没问题,我只是想知道简单短时的gFAP染色大家常用tbs还是 pbs去洗。
作者: Yedan    时间: 2012-6-14 12:01

本帖最后由 Yedan 于 2012-6-14 12:02 编辑 : U# X* N. S, L* ~9 c

  c4 D4 u0 V& K3 w回复 dianying 的帖子
' Z" u) t; ]% |2 k, g/ Q! E/ T* A4 i# u" e5 u" z9 w- x0 c1 M/ _0 T
洗的时候不就是用封闭液去洗么,二抗完了染核的时候用PBS就行了
作者: dianying    时间: 2012-6-15 09:45

回复 Yedan 的帖子: t& m( W+ B: V* Y! R
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第一次听说用封闭液去洗 ,可能是我孤陋寡闻了。
作者: dianying    时间: 2012-6-15 09:49

回复 Yedan 的帖子8 r2 I5 Q% @* r" i5 d% j

. D; A* a6 k. i2 k9 k看来你的方法比较传统,染核现在大家普遍用Mounting Medium with DAPI, 除非你的核很难出来。
作者: Yedan    时间: 2012-6-15 13:09

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% _* K( Y1 _5 g2 B. l0 x! s染色不用封闭液去洗,难道用什么?封闭为了防止非特异性产生,你用PBS或者别的什么把BSA/IGG洗掉了,那不是白封闭了?染核……PBS+核染料就够了,没那么复杂,mES/hES都这样
作者: dianying    时间: 2012-6-16 12:25

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. B/ R( O; l3 O- \4 S5 x' }8 W. b; r9 t( V* V
那你有没有染过gFAP?表达的如何?可以分享吗?
作者: Yedan    时间: 2012-6-16 13:47

你要什么细胞的mES/iPS EB分化的么 hES的我做的neuron的 没GFAP只有nestin
作者: dianying    时间: 2012-6-17 02:59

回复 Yedan 的帖子3 F2 @! e* L4 O+ }4 ]

$ [9 M1 a8 y! i我想看看标神经元和胶质细胞加DAPI三标。




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