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标题: 养的293T细胞中出现了克隆球，不会是ES细胞污染吧？求高手指教 [打印本页]

作者: zlqamy 时间: 2012-6-14 08:53 标题: 养的293T细胞中出现了克隆球，不会是ES细胞污染吧？求高手指教

养的293T细胞中出现了类似ES细胞的克隆球，不知道是不是ES细胞污染了，可是ES细胞能在普通的D/F12血清培养基中维持不分化状态吗？养了2天的293T，差不多都长满了，但是有几个部位却一个细胞都没有，看着像噬菌斑，到底是怎么回事啊？求高手指教啊！

作者: zlqamy 时间: 2012-6-14 08:53

想发图片，可是怎么发呢？

作者: zlqamy 时间: 2012-6-14 09:01

图片附件: [贴壁的克隆球] 293T1.jpg (2012-6-14 08:57, 654.15 KB) / 下载次数 125
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图片附件: [悬浮着的克隆球] 293T2.jpg (2012-6-14 08:58, 900.38 KB) / 下载次数 122
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图片附件: [细胞已经长满，但是边上的空白处却没长起来] 293T3.jpg (2012-6-14 08:59, 511.42 KB) / 下载次数 158
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作者: rainnyshine 时间: 2012-6-14 09:38

应该不是吧，另外阁下293T状态不怎么好啊，好多小窟窿

作者: lxm5668 时间: 2012-6-14 09:47

肯定不是污染，这种情况我也出现过。楼上说你的细胞状态不太好，传代之后就会好的，但是球球不会消失，而且越聚越多。离心可以除去。

作者: myboluo 时间: 2012-6-14 12:42

细胞状态不好罢了，应该不是污染。之前养同样出现过这种情况，而我们实验室从来不做ES细胞。0 D! w8 ~& F5 s7 T& [5 A
成球的应该是成团掉下来的293t细胞，你说的“噬菌斑”应该也是这样形成的，之前遇见这种情况我猜测是局部细胞密度过大。楼主回忆下你消化时是不是细胞没吹匀，或细胞没吹散，然后细胞是一个聚落一个聚落长起来的？这样就容易使局部生长过密。293t生长还是挺快的，而且很容易聚团长，消化时需要多吹打，勤传代，密度太高肯定影响细胞生长。

作者: yunxinxu 时间: 2012-6-15 02:51

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严重同意楼上

作者: zlqamy 时间: 2012-6-15 08:41

回复 myboluo 的帖子' b! u$ v- _5 B$ X
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非常感谢！

作者: lazyworm 时间: 2012-6-15 08:51

应该是细胞密度太大的缘故，或者是在传代时，消化不够，本来293T贴壁不牢，成片下来再种就会不均匀，密得地方就会这样。所以不要等到太密再传代，这样细胞状态也会不好哦。

作者: huangcong1988 时间: 2012-6-16 08:49

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细胞形态不太对吧？感觉形态怪怪的

作者: sfeifei 时间: 2012-6-26 13:11

我在做G418筛选的COS7细胞的时候遇到过这种情况，因为COS7也是那种长得很快的细胞。在筛选了一定时间，阳性细胞的地方就越长越密，最后就在有的孔里面出现这中东西，而且还有这个飘起来的，非常恶心，也不是什么细胞状态不好，就是长太多了。所以你只要在消化之后，吹打得匀一点，再接种到新的培养瓶里面就好

作者: liumenghan 时间: 2012-7-16 23:11

最近在养293T，你这应该不属于噬菌斑，噬菌斑的外部轮廓不应该这么不规则的……

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