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标题: 请各位大神帮忙看一下我的细胞！ [打印本页]

作者: camus 时间: 2012-6-27 21:28 标题: 请各位大神帮忙看一下我的细胞！

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这是最近养的细胞，小鼠的骨髓间充质干细胞，说实话，刚开始养的比这个烂的多，虽然现在养的也不好，但是比之前强一点了，都是论坛各位战友无私帮助我才有这么一点点转机的，在这里真的很谢谢大家！！！
现在有几个问题想请教大家：
1.我这个细胞是P2，请问从形态上看，可以做细胞的免疫荧光了吗？
2.如果可以，请问各位当时是用的哪家公司的抗体，具体是什么抗体呢？
3.请问现在这个细胞还存在什么问题？麻烦大家告诉一下，本人确实水平有限，但是很想知道自己的不错，这样才能养的更好* G5 S1 L k$ X4 p. W7 b

最后，真心感谢最近大家对我的帮助，从第一次养到现在已经整整一个月了，谢谢大家！

作者: camus 时间: 2012-6-27 21:28

另外，视野里的小黑点不是污染，是实验室的显微镜的问题。。。。。' B, K4 p0 m2 x2 o. g1 \

作者: 素心无痕 时间: 2012-6-28 09:12

小黑点会不会是坏死的细胞聚集？

作者: pipi168 时间: 2012-6-28 10:41

生长良好

作者: tutufei 时间: 2012-6-28 11:02

请问楼主是怎么养的？

作者: glysh 时间: 2012-6-28 17:20

楼主在做的过程中有没有发现其实这是两群或者三群细胞？其实不纯，小鼠的骨髓MSC过了前三代会稍微纯一些。

作者: camus 时间: 2012-6-28 21:09

回复素心无痕的帖子

哦，不是，因为所有人的照片都这样，移动镜头就会变得。。。嘿嘿

作者: camus 时间: 2012-6-28 21:09

回复 pipi168 的帖子
& S6 l* v8 Z# r. G% e: \% {
谢谢，哈哈~

作者: camus 时间: 2012-6-28 21:10

回复 glysh 的帖子4 }& i; v8 ^1 i1 c. y0 `6 j' w, S

太感谢了，我只是觉得形态有些差不少，我以为是发育不同的问题，请问能指出有什么样的细胞吗？在我发的图片中能大体指出来吗？不胜感激！！

作者: camus 时间: 2012-6-28 21:14

回复 tutufei 的帖子7 f7 {0 Y& F6 f8 Q# }3 Q

我的培养基是这样的：LG-DMEM+10%FBS+1%双抗+2MMOL/L谷氨酰胺% w: y1 r4 m2 P9 Q! o' X. ]4 b
都是从GIBCO公司买的

作者: camus 时间: 2012-6-28 21:16

回复 glysh 的帖子

还有，请问过了三代之后，到了后面，会不会出现老化严重的现象？多久传代一次大概？谢谢！

作者: glysh 时间: 2012-6-29 08:11

回复 camus 的帖子# R6 p, {! q5 a$ i% I* K; a
) C$ c1 Y/ x: K& Q- ?8 V# n
你发的图片，我大体能看到两群，一群是细胞个头较小，纤维状的；还有一群是圆形的，形态稍大。以我们的经验，这两群细胞都不容易消化下来，真正的能够传代并增殖快的，是个头大点的纤维状细胞，成旋涡状克隆，我好像没有看到。过了三代之后，细胞纯度较纯，如果养的好，细胞老化现象不明显，但是养不好的话就不长。

作者: camus 时间: 2012-6-29 14:51

回复 glysh 的帖子, m! R6 N/ \* Y) F3 v* a6 B

太感谢了，请问一下老师，我现在确实是遇到有的细胞很难消化掉，有的细胞大概四十秒左右就可以消化下来的情况。请问，是前面容易消化下来的细胞才是骨髓间充质干细胞吗？哪那些很难消化下来的细胞是什么？如果只有前面的细胞是间充质干细胞的话，我觉得我养出来的量好少啊。。。。。再次感谢！

作者: pipi168 时间: 2012-6-30 17:36

回复 camus 的帖子

现在很少有人用了

作者: camus 时间: 2012-7-2 22:44

回复 pipi168 的帖子9 A# X- G* p6 ^

啊？
很少用神马？

作者: asa_ok 时间: 2012-7-3 10:46

回复 camus 的帖子 J: x4 X; m! ]+ Y

你的培养基没有间充质干细胞生长添加剂吗？

作者: camus 时间: 2012-7-4 16:19

回复 asa_ok 的帖子6 [. R( r# p0 W6 b& X

没有，请问那个必须加吗？) u1 h9 n6 ?* n( q# l C Y

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