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标题: 为什么随着冻存时间的延长细胞活力反而增加呢？ [打印本页]

作者: 学无止境 时间: 2012-7-2 19:10 标题: 为什么随着冻存时间的延长细胞活力反而增加呢？

各位同仁们，我目前遇到一个现象：神经干细胞为什么随着冻存时间的延长细胞活力反而会增加了呢？还有单个核细胞冻存也是一样的，冻存一周后复苏的活力反而没有冻存了一年以后的活力高。请高人指点

作者: 大少爷 时间: 2012-7-2 21:02

是同一批次的细胞进行对比的吗，有点假，你活率是怎么计的？

作者: haiq1984 时间: 2012-7-2 21:14

批间差异！！！并不能说明问题的。

作者: birdflubirdflu 时间: 2012-7-2 21:20

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请注意:冻存条件的细微不同，以及冻存时NSC状态的不同。甚至是你复苏时处理的细微操作等因素都会影响活力。不能简单得出这个结论的。

作者: 学无止境 时间: 2012-7-3 07:57

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脐血单个核冻存可能是批间差异，但是神经干细胞，我冻存的却是一个批号的，同一天冻的。

作者: 学无止境 时间: 2012-7-3 07:59

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冻存时NSC都是一个批号的，生长状态应该基本上没有什么区别。复苏时的操作都一样，没有啥改变的啊

作者: pailishi 时间: 2012-7-3 08:15

确实很可疑，必须保证所有条件一致，包括培养基什么的，而且还要重复很多批次重复试验才行呢

作者: meister 时间: 2012-7-3 08:40

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肯定你的实验方法有问题。这种事情是不存在的。

作者: yiyeqiu 时间: 2012-7-3 08:51

会不会你复苏的细胞有些没浸没在液氮里面，而一年后复苏的细胞一直是储存在液氮以下的呢？

作者: 小渝 时间: 2012-7-3 09:10

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想请教下老师，那个冻存是直接冻存神经球吗？另外冻存的时候直接加DMSO和培养基吗？非常感谢呀！

作者: 学无止境 时间: 2012-7-3 09:53

回复小渝的帖子, Z* c8 t2 q% g0 D5 K
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我们用的是直接购买的“非程序无血清神经干细胞冻存液”成品。自己用DMSO和培养基配的冻存液，用来冻神经干细胞活力太低了，有相关文献报道活力也就是40%~60%之间，远远不够80%的标准。

作者: lxm5668 时间: 2012-7-3 10:39

就像厨师炒菜，这一盘和下一盘菜味道可能会不同。
你说是一周和一年的比，怎么可能是同一批次的呢？

作者: 小渝 时间: 2012-7-3 11:06

回复学无止境的帖子- c; D( z% }1 [8 t

谢谢呀，想问下那东西贵吗？大概多少钱呀？

作者: ssyt 时间: 2012-7-23 14:03

怎么可能？先看看检测本身有没有问题吧？你们做内控吗？

作者: odin_jing 时间: 2012-8-1 18:45

按目前的知识来说，细胞活力是跟冻存时间成反相关的，既然楼主您排除了细胞批次不同的原因，那我想还可能有两个因素导致这一现象：1、您两次复苏及培养操作和条件的不同，如果您的细胞是同一批冻的，那么间隔了一年您的实验操作肯定比之前要成熟了很多，所以后一次冻存一年在复苏的细胞状态很可能因您实验操作的进步而有改善；2、细胞冻存一周即复苏检测，此时细胞刚从正常培养状态转变到冻存状态，虽然肉眼看不见，但细胞内部还是会有一些微弱的活动的（只要没达到绝对零度，电子还在运动，那么化学反应就还能发生，只是极其微弱而已），所以，冻存一周时细胞可能还处于过渡状态，而一年后，细胞状态稳定，已非常适应冻存的条件了。细胞状态不稳定是对活力不利的。建议：楼主您如果有兴趣也有时间精力，不妨试试把比较的时间间隔设为1,2，……12个月或更长，同时注意操作和样品的可重复性和平行性，做好统计处理，因您的比较时间跨度很大，要是不做统计的话，结果就没有任何意义了。

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