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标题: 我刚刚接触DC-CIK,有一些不明白的地方,请教一下群里面的大神,谢谢 [打印本页]

作者: 113305060    时间: 2012-7-5 09:03     标题: 我刚刚接触DC-CIK,有一些不明白的地方,请教一下群里面的大神,谢谢


; o* K: B, p" J3 H  I2 V: s我刚刚接触DC-CIK,有一些不明白的地方,请教一下群里面的大神,谢谢; a; G0 D6 u  \! h
1.培养基的使用,我们实验室以前一直使用DMEM培养间充质的,我查文献上面说养PBSC需要用1640培养基,请问用DMEM可以替代吗?两者培养对PBSC影响大吗?
1 W" `* p) x  h, z5 {0 A/ F7 O2.我前天提的PBSC(外周血单个核细胞),放在直径100mm培养皿里面培养,48H后换液观察发现有一些点状贴壁,请问一下PBSC贴壁是不是也像间充质干细胞一样一开始呈现梭形,谢谢!
作者: wagumaxida    时间: 2012-7-5 11:41

113305060 发表于 2012-7-5 09:03 0 k9 P. b  s5 O! J2 y2 H$ V% d8 r
我刚刚接触DC-CIK,有一些不明白的地方,请教一下群里面的大神,谢谢
! A2 E$ i& l. r1 S' u/ X  x( H6 k5 L1.培养基的使用,我们实验室以前一 ...
7 N$ m3 Q- |6 r* E
纠正一下 不是“PBSC”,是“PBMC”, o0 d. R- T4 r5 y
1.尽量不要替代,要替代也要用类似的培养基,比如DC培养基,AIM-V等,影响比较大  I7 T) y4 ~, B+ k. Y) n7 Q" y
2.呈现贴壁梭形很可能是巨噬细胞
作者: 113305060    时间: 2012-7-5 12:54

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/ U1 ]# m7 {* U, }" H2 H
, d* K& B( v+ ]0 l! t! B" N+ k+ u我看文献上说提取的白膜层细胞后于细胞培养皿培养2H后,悬浮细胞用作培养CIK,贴壁细胞用作培养DC,请问一下这个时候的悬浮细胞和贴壁细胞分别是什么细胞,谢谢
作者: 大少爷    时间: 2012-7-5 13:13

外周血单个核细胞,细胞培养皿培养2H后,悬浮细胞主要是淋巴细胞,贴壁细胞主要是单核细胞。
$ d# L7 k3 Y9 h) V# H( b$ h5 i) g% ?
5 N7 u9 B, H3 Y& b" W贴壁后的长梭形细胞是主要是巨噬细胞,不是DC细胞。
作者: lazyworm    时间: 2012-7-6 08:27

1640一般是用来培养肿瘤细胞的。分离出的PBMC包括淋巴细胞和单核细胞,单核细胞要经过细胞因子的诱导才能成为DC(树突状细胞)。
作者: 113305060    时间: 2012-7-6 08:45

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9 A$ {& k0 ]# _; P$ H
$ ], @, \& s+ d4 `, c) u! Y请问一下贴壁的单核细胞贴壁的时候是什么形态,谢谢
作者: 大少爷    时间: 2012-7-6 16:14

圆的,诱导成DC之前不好分辨,四五天的时候细胞周围会有毛刺。
作者: deshenglll    时间: 2012-9-26 15:35

学习
作者: deshenglll    时间: 2012-9-26 15:35

学习
作者: wwxx66    时间: 2012-11-10 15:45

学习一下!1640最初设计是用来悬浮培养淋巴细胞的,一般不能代替使用。贴壁的CIK 长三天成大的集落就自己浮起来了。




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