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标题: 拿小鼠的基因表达序列转染大鼠细胞，这样能行吗？ [打印本页]

作者: wiling123 时间: 2012-8-13 17:17 标题: 拿小鼠的基因表达序列转染大鼠细胞，这样能行吗？

问题，这样的做法，国外能接受吗？0 s- J j9 h7 {/ p# i

如果不考虑，细胞移植后免疫反应，就体外实验而言，这段小鼠基因表达产物会不会影响大鼠细胞？

作者: frankieisme 时间: 2012-8-13 22:28

只要你载体的启动子能工作,能表达出该蛋白,理论上就是可行的.至于是否会影响大鼠细胞的功能这个就很难说,需要后学的探讨.

作者: weiyepan 时间: 2012-8-14 05:00

转基因表达从来就不care转入的基因是从哪个物种来的，GFP还不是在各种生物中表达么。

作者: lxm5668 时间: 2012-8-14 07:33

楼上两位大侠言之极是，无论转染进去什么基因片段，蛋白表达是没有问题的。, T; z" x1 h$ J! O
你提出的"这段小鼠基因表达产物会不会影响大鼠细胞"这个问题，是否有影响要看你所转染的这段基因序列是什么样的功能，比如参与细胞凋亡、细胞增殖、细胞骨架、细胞迁移等等功能的话，那就会影响大鼠细胞的凋亡、生长、细胞形态、粘附性等方面，毕竟大鼠和小鼠存在基因同源性是不低的。

作者: lxm5668 时间: 2012-8-14 07:33

楼上两位大侠言之极是，无论转染进去什么基因片段，蛋白表达是没有问题的。
你提出的"这段小鼠基因表达产物会不会影响大鼠细胞"这个问题，是否有影响要看你所转染的这段基因序列是什么样的功能，比如参与细胞凋亡、细胞增殖、细胞骨架、细胞迁移等等功能的话，那就会影响大鼠细胞的凋亡、生长、细胞形态、粘附性等方面，毕竟大鼠和小鼠存在基因同源性是不低的。

作者: shy8610 时间: 2012-8-15 10:40

如果仅仅是细胞转染的话，完全没有问题，我们在体外实验中，经常转来转去，生物界中，病毒入侵就是如此，还是转基因的植物或动物才是，至于影响大鼠体内的生理功能，那得看情况，不知楼主要表述的真实意思是？

作者: wiling123 时间: 2012-8-15 11:25

回复 lxm5668 的帖子

同源性不低，意思就是说，还是有希望的吗？. X; {# @; Q2 k( B
* A+ \6 F/ E, H9 m# R
因为我手上只有小鼠质粒，而小鼠细胞很不好养，大鼠细胞倒是有，但是大鼠质粒GC含量太高，调取都非常难。- D3 \2 r4 J9 Q+ ]3 ]

那请问，有没有办法去分析这个蛋白的同源性吗？谢谢

作者: wlj0912 时间: 2012-8-15 13:53

您好，您的是大鼠的什么细胞，我们最近在做细胞实验，急需大鼠细胞，不知能否馈赠，

作者: shy8610 时间: 2012-8-16 09:14

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+ l$ v. K' }* K9 Z# h% r
小鼠细胞不好养吗？不知道wiling123的细胞是哪种？应该不会啊，是已经成细胞系了还是原代分离的？

作者: wiling123 时间: 2012-8-16 18:36

回复 shy8610 的帖子! Y6 ?9 b3 d2 S+ {1 k5 u9 Y
8 z, o- W# v- c' m0 u% }* `
大鼠脂肪干细胞。

作者: wiling123 时间: 2012-8-16 18:37

回复 shy8610 的帖子2 m; N) N+ P) Z( e

分离的原代

作者: guokeliuhen 时间: 2012-8-31 00:35

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) Q9 d5 p& Q" Q- Q6 f( o; Z* V
基因的表达理论上是没有选择性的，只要你有合适的启动子和终止子；但是表达后的影响就不一样了，如果你这个蛋白是小鼠跟大鼠都有的蛋白可能问题不大，但如果是差异蛋白就不好说了

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