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标题: 为什么CD133细胞核阳性 [打印本页]

作者: 2836yzzy 时间: 2012-8-30 15:18 标题: 为什么CD133细胞核阳性

1、标本是乳腺癌组织白片$ d/ R/ T3 `1 r) Y! S
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2、60℃考2小时。
3、二甲苯三缸Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、脱蜡，各10分钟。( n3 R( M  f, J9 F
4、无水乙醇两缸，各 2分钟；
5、95%酒精二缸，各 2分钟；
6、自来水流水冲洗2分钟；2 i) ^# e: b& O1 z+ X: `
7、PBS冲洗2分钟；2 W5 j5 u" l, C$ p! t( G
8、将已冲洗干净组织放入高压锅内，加入约2000ml左右柠檬酸盐的抗原修复液（pH6.0）盖好高压盖检查安全筏，沸腾喷气1.5分钟。
9、自然冷却移至蒸馏水中浸泡2分钟。
10、3%H2O2中浸泡10分钟，蒸馏水冲洗3min×3次。' |$ a2 ^8 I! w: k0 D
11、取出切片，擦干组织周围的水，用免疫组化油笔画圈笔在组织块周围画一圆圈，
12、PBS缓冲液冲洗。3 p: ~4 x  ^& c; h$ z# I! b
13、加一抗(CD133)孵育（PBS配制，1：100），将切片放入孵育湿盒中，4℃的恒冰箱中过夜。: @: N! h5 S  J/ U. E
14、用PBS洗3次，每次3分钟。6 Q4 R, A# f* Z9 j  I" G4 u
15、加二抗在组织上、放入37℃恒温箱中孵育30分钟。（兔/鼠通用二抗）
16、用PBS洗3次，每次3分钟。
17、DAB显色。& X( z! n1 X0 a4 P4 G0 a
18、苏木素染液复染10分钟，
19、1%盐酸酒精分化3秒钟。) {+ U. ?+ j2 O; I+ u6 ^
20、流水冲洗5-10分钟。
21、95%酒精二缸，各 2分钟无水乙醇两缸，各 2分钟；
22、二甲苯I、II、Ⅲ，各2分钟23、中性树胶封片) E/ U4 `% y0 a+ M3 i' s5 z
结果：我自己觉得CD133是细胞核阳性。不知道是什么原因，帮我在分析一下
这是厂家第二次给我的抗体，第一是细胞核我以为是抗体原因。4 @& N- t) S1 l7 y4 j6 V
3 i. b* t9 h+ p2 ?! J9 i

作者: 2836yzzy 时间: 2012-8-30 16:00

, e: \4 e) _0 N. H2 s: M6 K
3 N8 D" y$ y' C' f
这是我上面试验图片结果，阴性对照是全阴性

图片附件: caporg45.jpg (2012-8-30 15:56, 67.9 KB) / 下载次数 75
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=NDU1NjB8ODkwNjNjNWN8MTc5MTc3MzAwNXww

作者: evial 时间: 2012-8-30 22:17

哪些是阳性？蓝色的？还是棕色的？

作者: wangyashuai 时间: 2012-8-30 23:01

回复 evial 的帖子' B9 I) b t: S6 Y9 w3 k( |6 b5 h

棕色是阳性结果，蓝色是阴性

作者: evial 时间: 2012-8-31 11:01

CD133哪有那么多啊！！！干性细胞也就百分之几而已。这个结果肯定有问题

作者: 2836yzzy 时间: 2012-9-3 11:05

肯定是有问题就是想知道怎么解决？？？

作者: 2836yzzy 时间: 2012-9-3 11:06

应该是细胞膜是阳性

作者: 细胞海洋 时间: 2012-9-3 19:32

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