干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 请问这是小鼠MSC么有点纠结 [打印本页]

作者: varing 时间: 2012-9-3 10:06 标题: 请问这是小鼠MSC么有点纠结

用小鼠全骨髓法做的原代，操作了两次，现在一皿为F2代，另一皿为F1代。有经验的大神鉴定一下，这里面有小鼠MSC么？貌似纯度不行吧？
[attach]45644[/attach]
[attach]45643[/attach]3 [1 ]0 p* T8 z" [1 V
[attach]45642[/attach]

作者: ind6562 时间: 2012-9-3 11:06

你这是在96孔板里的细胞吧？你想在形态上确认你的细胞的话，最好先种在培养瓶或六孔板，这样在显微镜下才看得清楚些。其实你的细胞大部分是梭形的，但在96孔板的视野下一些“尖出”的结构你看不清楚（至于为什么小孔看不清楚就涉及光学的知识了）所以你不敢确定。
另外，MSC一般在F3代的状态、纯度较好，我们这边移植都用的F3代。

作者: varing 时间: 2012-9-3 11:13

回复 ind6562 的帖子# T7 s0 z5 h* ? x! ]

六孔板里面照的哦，你说的“尖出”结构在显微镜下是能看到的。不能确定这是小鼠MSC？

作者: ind6562 时间: 2012-9-3 12:44

回复 varing 的帖子# N( G0 v3 R2 w4 i

你的图片不名够清晰哦，你试下把亮度调高点再照些，发上来看看吧。下面这张是别人发的图，是人的MSC
[attach]45653[/attach]; `( r* e0 }* E; j( |1 z$ O

还有，要确定是不是MSC，单凭形态学上的鉴定是不够的，严谨的实验还要鉴定波形蛋白和多种CD分子，要做组化和流式来检测。

作者: 蔚海橙天 时间: 2012-9-5 11:40

是的，最好看下你周围哪有做流式比较牛的地方，因为要用到多种抗体，可以委托他们帮你鉴定，如果自己买会很费银子的，一般CD-44，CD-29，CD-71，CD-90，CD-105，CD-117，CD-271阳性，CD-45，CD-34，HLA-D2阴性，你可以参考下其他文献怎么做的，或者先选择其中的几个试试

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)