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标题: 脐血间充质干细胞培养问题 [打印本页]

作者: dc1818 时间: 2012-9-13 14:42 标题: 脐血间充质干细胞培养问题

我最近用了含10%FBS的DMEM/F12培养基和含30%FBS的DMEM/F12培养基做对比培养，发现10%组明显比30%组长势要好，30%组成细胞团生长，请问有哪位大侠能指点指点吗？

作者: zhujiang007 时间: 2012-9-13 15:59

这个是肯定的！血清浓度一般在10%~20%之间，太高的浓度会影响细胞的生长，正所谓“物极必反”。

作者: wujh1986 时间: 2012-9-13 16:52

血清浓度在5-10%之间,10%已经很好了,你加30%,浓度过高,细胞营养过剩了.
脐带MSC算是容易养的了

作者: seabirdbecky 时间: 2012-9-14 11:46

路过学习一下

作者: dc1818 时间: 2012-9-14 13:32

回复 zhujiang007 的帖子6 _8 c- q, |! a) c3 k. G5 _
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我后期换液都用10%的，不知道会不会长好

作者: zhanglei1414 时间: 2012-9-16 21:48

10%的血清足够了

作者: 湖南干细胞 时间: 2012-11-1 10:31

回复 zhujiang007 的帖子* `( V4 e8 q* W( X t" D
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求教：如果是脐血间充质干细胞培养，多少ml脐血分离后可以接种到T25瓶中培养，培养基：用了含2mmol/L左旋谷氨酰胺的L-DMEM+10%胎牛血清，是不是需要添加细胞因子，我的细胞培养到第6天就飘起来了。都是圆形的，没有梭形的，也没长触角。现在就快开始新一批的脐血培养，很着急。

作者: 回到从前 时间: 2012-11-1 10:35

30%的血清细胞容易老化的，10%完全可以了

作者: pipi168 时间: 2012-11-1 10:51

10%是最佳浓度

作者: xuzhijuan1989 时间: 2012-11-1 23:19

有养成功脐血MSC的大侠吗？我养了4个多月都没有成功，希望各大侠能分享下分离培养的方法，谢谢！

作者: 细胞海洋 时间: 2012-11-2 09:04

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建议你发新帖提问详细说明你的问题

作者: 回到从前 时间: 2012-11-2 10:35

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你是怎么做的呢？可以换换来源啊，脐血里的MSC很少，看看你用什么培养基

作者: xuzhijuan1989 时间: 2012-11-2 21:38

回复回到从前的帖子
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我用的密度梯度离心法，2000rpm 20min ，培养基也从GIBICOL换到了STEMCELL间充质干细胞培养基还是没什么进展，来源的话我老板的课题就是这个，恐怕换不了。问题就是分离出来有很多圆细胞，而且那些细胞会越来越大

作者: xuzhijuan1989 时间: 2012-11-2 21:40

回复细胞海洋的帖子" S' o5 a; h3 m0 c7 R' ?. _
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我的问题就是分离出来的细胞中有很多圆细胞贴壁，而且这些细胞会越来越大，梭形细胞很少

作者: 回到从前 时间: 2012-11-2 21:42

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哦那应该不是间充质啊？脐血多久处理的？

作者: xuzhijuan1989 时间: 2012-11-2 21:49

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那些圆的细胞肯定不是，脐血快的话1小时内，晚一点的话也在6小时内

作者: 回到从前 时间: 2012-11-5 10:22

回复 xuzhijuan1989 的帖子

我感觉你培养出来的应该是造血祖细胞，而不是间充质干细胞，脐血里的MSC本身就很少，可以试试用磁珠分选呢？

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