干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 脐带酶消化法中的一种杂细胞 [打印本页]

作者: huajie881026    时间: 2012-10-11 23:40     标题: 脐带酶消化法中的一种杂细胞

脐带用酶消化法(胶原酶+透明质酸酶+胰酶)分离MSCs时,在第十天培养瓶中出现一种杂细胞,消化时这种细胞短时间消化不下来。查了下文献,感觉像是内皮祖细胞?(脐带只剥离了两根脐动脉,脐静脉未剥离)不能确定,故发上来给大家鉴定鉴定。
! ^  `, O) V0 j4 p5 `图为200×+ o6 [2 ~9 h( w
[attach]46564[/attach]
作者: sj842563    时间: 2012-10-12 08:41

我也有这种杂细胞,我分离的脐静脉,但是没分离羊膜层,我想应该是上皮细胞
作者: jensn    时间: 2012-10-12 09:53

从图上看,应该是内皮祖细胞占据了大多数,也有梭型的间充质干细胞存在。很能消化下来的我觉得还有可能是成纤维细胞
作者: Roden    时间: 2012-10-12 10:30

上皮样细胞。
4 c: a# C5 n0 ], r" j) @* {+ y/ r疑似来源于脐带系膜,楼主应该是没有剥离脐带外表层系膜,不过这类细胞生长缓慢不易消化,慢慢就被间充质细胞稀释了。
作者: lazyworm    时间: 2012-10-14 21:37

脐静脉没剥离,可能是内皮细胞,在低倍镜下是不是可以看到这些细胞周围有比较平整的界限,一圆团一圆团的。
作者: huajie881026    时间: 2012-10-14 21:51

回复 lazyworm 的帖子
5 q! N: B/ \+ X1 d5 m  X7 x! j' B9 b( U" \7 L" z/ x
嗯 是的呢。。。这么说就是内皮细胞洛?
作者: lovesxj941    时间: 2012-10-16 10:58

虽然应用消化法消化脐带,但是也可以尽量选择Wharton's Jelly层。这样MSC分离效率会高。不注意分离的话 很容易出现内皮细胞。
作者: Tim    时间: 2012-10-17 11:50

回复 huajie881026 的帖子6 [# j, P# Z5 r; N

. c" i9 r# ?+ y3 o9 g& |内皮细胞养的很好!你可以试着取材的嘶吼弄干净!我一般3条血管都去除了!膜也去除了!养的很好!一条脐带我最多贴壁养2瓶!
作者: 枫之叶影    时间: 2012-10-17 15:34

这个有点像血红红细胞,我们曾经养过脐带间充质干细胞,去掉了2条脐动脉,一条脐静脉,羊膜也去了还是有上面的细胞,但是养一段时间就渐渐没了
作者: deshenglll    时间: 2012-10-26 16:00

是上皮细胞。没事的,贴壁比较牢固,用胰酶消化较难消化下来。所以不必担心。这类细胞在培养瓶上可以看到一圈白色的圈。对间充质细胞生长影响不太大。
作者: lyj-0017    时间: 2017-4-19 18:54

回复 huajie881026 的帖子( `* H0 j$ R% y0 c/ ~

4 p0 I" |) U4 F0 j8 v可否发一份消化方案学习一下?
作者: lyj-0017    时间: 2017-4-19 18:54

回复 huajie881026 的帖子
; B! C8 h/ g: z0 A  c
# w! x% F! y  @, {可否发一份消化方案学习一下?
作者: lyj-0017    时间: 2017-4-19 18:54

回复 huajie881026 的帖子# o3 ?* a' Z' f& w. Q) N1 E! z  }" r

3 E  R+ w; o$ v可否发一份消化方案学习一下?
作者: lyj-0017    时间: 2017-4-19 18:54

回复 huajie881026 的帖子' q: P8 C" f: a  A6 x

/ a5 a/ V% K7 [- [可否发一份消化方案学习一下?
作者: lyj-0017    时间: 2017-4-19 18:54

回复 huajie881026 的帖子
4 J& b0 q- ^& D+ `6 G; e) G& l8 f. i8 }9 i, H$ m% J( V6 {
可否发一份消化方案学习一下?
作者: yanxm920    时间: 2017-5-11 15:50

楼主的细胞应该是上皮细胞污染,这种细胞会影响细胞的纯度,但是传代久了会消失。因为这种上皮细胞很难消化下来,意0.25%胰蛋白酶需要消化10分钟左右,而MSC基本上1分钟内就会被消化下来,但建议做的时候还是去掉血管(3根)和表皮,主要取华通氏胶来培养间充质细胞,望采纳!!
作者: 漾轩    时间: 2017-5-11 17:02

回复 yanxm920 的帖子. l5 j$ X* c8 h2 ?2 M
- v" e  s6 I' G





欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5