干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 293T养不好，前辈帮忙来看一下吧！ [打印本页]

作者: yuhaoze 时间: 2012-10-17 09:27 标题: 293T养不好，前辈帮忙来看一下吧！

293T本来状态不好，昨天传代了，1传4，明明吹打成单个悬浮细胞了，今天早上来看，细胞都聚成一团一团的，而且还有很多黑色的东西，请前辈们指点指点，这细胞怎么才能养好？

作者: eley 时间: 2012-10-17 09:42

消化过了，这株细胞貌似只能换了

作者: friendly0722 时间: 2012-10-17 09:42

状态不好的细胞最好不要1:4传了，另外这个细胞貌似有支原体污染（次要原因），细胞不知道消化了多久，建议重新解冻早一些的细胞

作者: jihaijie 时间: 2012-10-17 10:16

这个污染了，看看培养基浑浊没？

作者: yuhaoze 时间: 2012-10-17 10:20

回复 jihaijie 的帖子
6 q9 i! B4 P' r1 k
没有

作者: 辛西雅 时间: 2012-10-17 11:00

杂质那么多，死细胞也多，细胞生病了，我无解

作者: 辛西雅 时间: 2012-10-17 11:01

原来版主也是有问题不能解决的啊

作者: yuhaoze 时间: 2012-10-17 11:23

回复辛西雅的帖子

角膜缘干细胞版主.....:P

作者: 希望之光 时间: 2012-10-17 11:38

污染了

作者: flowguo 时间: 2012-10-17 12:36

我觉得293T千万不能长的太老，太慢太老后传代细胞状态就不行了。看图片是救不会来了，重新复苏一只吧。

作者: yuhaoze 时间: 2012-10-17 13:33

回复 flowguo 的帖子
' f3 r$ e5 d8 w7 B# t7 K# Z( V
恩，让我扔了，今天又传了一瓶，有点问题想问问您：
传完了之后镜检看到都是单个的细胞，可过了一会儿再看就是一团一团的了，这个怎么办？
用不用胰酶消化？一吹就吹下来了

作者: Dongqin11 时间: 2012-10-17 13:57

细胞间隙之间的死细胞碎片好多，还聚团生长。这样细胞生长的会很慢，而且细胞不会铺开生长，被夹在中的细胞就会慢慢老化死亡。估计你这个应该是支原体污染，建议丢弃这种细胞，做好消毒工作。重新复苏细胞的时候可以加大血清浓度，比如到20%左右，先养两天。

作者: jihaijie 时间: 2012-10-17 14:13

多长时间培养基没有浑浊？不是污染的话那死细胞太多了，都是碎片。

作者: jihaijie 时间: 2012-10-17 14:13

293T还是很好养的

作者: yuhaoze 时间: 2012-10-17 14:22

回复 jihaijie 的帖子5 l1 M- N1 S- i: b$ ^

就是啊，但是我怎么养不好呢

作者: jihaijie 时间: 2012-10-17 14:24

莫急，细胞不要总动，放上3天或培养基不发黄就不用动

作者: yuhaoze 时间: 2012-10-17 14:26

回复 jihaijie 的帖子5 h# v8 b r/ z. J; ]( [
3 ?% {( \5 }: i" D0 _( o' h
好。上面有个师姐说的支原体感染，这个概率大吗？需要把试验台彻底消毒一遍吗？

作者: salomemao 时间: 2012-10-17 15:24

消化过了吧,还有就是培养液中杂质太多,全部都换一遍吧

作者: lazyworm 时间: 2012-10-18 11:50

293T细胞还是挺好养的，一，密度不要养到太大时消化，这样状态不好；二，胰酶浓度不要太大，或者如果用0.25%胰酶的话，加上胰酶铺匀后要立即吸出，用残存的胰酶完成消化，看到变圆后立即中止。这些黑点如果不是污染就应该是细胞死亡后导致的。

作者: 第一心音 时间: 2012-10-18 17:40

这种情况不是污染，但是不是污染，是细胞本身不好了，不能继续用了，建议赶快扔，扔了再买。

作者: xxh83121 时间: 2012-10-18 19:38

各位大侠都是从哪里买的的细胞？我都买了两次了，都是刚开始还行，后面一团糟，怀疑是细胞本身原因

作者: 前途似锦 时间: 2012-10-19 09:04

解冻新的吧这绝对是不行了

作者: jcb 时间: 2012-10-21 02:55

这个细胞只能扔了。我在-80放了三年的293都比你这个好。8 U, N* g4 O# L7 b, y6 J) R0 N
用于干细胞，包装病毒用的293千万不要有支原体的污染。滤膜也没有。
不要用抗生素。有条件也该用单独的培养箱，和其他细胞分开。每个月都应该查一次。

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)