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标题: 怎么才能抑制间充质干细胞老化 [打印本页]

作者: zhangxiudong 时间: 2012-10-18 16:34 标题: 怎么才能抑制间充质干细胞老化

我一直养间充质干细胞，但是有一个很突出的问题就是很容易老化，也总是有杂细胞，我认为最经典的鱼群状或呈漩涡生长的细胞才是最好的，但是只有原代是这样的，只要传代就会杂乱，我实在想不出什么原因或方法阻止它了

作者: mrstemcell 时间: 2012-10-18 17:03

鱼群状的描述我还是第一次看到，很生动！7 F( h W$ ^. n# ]/ d+ E
为防止MSC老化，建议降低血清浓度，降低传代时的细胞生长密度。

作者: sanna1 时间: 2012-10-18 20:22

我也有存在这个问题，恨头痛。血清是关键，但我倒觉得在传代时要增加细胞的密度。

作者: 星火燎原 时间: 2012-10-18 23:32

1、从原代着手，要控制原代的接种密度和培养时间，最好能在2周之内传代，时间久了就算长的很好，也会出现一传就老的现象。
血清最好用进口的，浓度可以相对高一点。传代时细胞不易长的太满，80%左右为宜，这还是要根据个人经验。临床上用于治疗的自体干细胞，由于病人长期接受常规治疗（抗生素类），导致干细胞数量减少，接种密度要大一些。8 Q# g, r& H* w
原代有杂细胞是很正常的，有集落就行，传代之后会好很多，第一次传代密度要大一点，否则很容易老化。
2、老化跟胰酶消化也有很大关系，要协调好消化的方式、时间和浓度。尽可能减少对细胞的损伤。原代细胞比较杂，贴壁时间长，贴的比较牢，相对较难消化。有些不是干细胞的要舍弃，不要等全部消化下来，消化过程中注意观察。
3、另外培养体系（温度、co2浓度、空气流通、ph值、培养液等）也很重要，要进行定期检测。

作者: zhangxiudong 时间: 2012-10-19 09:25

谢谢

作者: jj2570782 时间: 2012-10-19 11:07

进口血清或者加因子

作者: Tim 时间: 2012-10-20 22:10

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方便讲一下您的培养基吗？0 G- C: j* X4 |% r

作者: zhangxiudong 时间: 2012-10-22 09:12

就是A-MEM和10%进口血清

作者: deshenglll 时间: 2012-10-26 15:52

最好选低血清的培养基，接种时密度要适中，细胞要及时处理。

作者: 回到从前 时间: 2012-11-2 11:06

我个人觉得MSC老化的原因有以下几点8 P% g, n" q* T
1摸索着降低血清的浓度，最好是低血清培养
2传代的时候掌握消化的时间和方法，可以用比较温和的酶传代，或者将酶稀释下，这样可以减少对细胞的损伤，降低老化的可能. |0 y! F0 ^# ?) {0 C
3传代的时间上掌握好可以纯化MSC 降低老化的几率

作者: prophe 时间: 2012-11-2 12:55

合适的细胞生长密度，注意胰酶的消化时间，最好用进口的胎牛血清！

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