干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站
标题:
细胞培养液中、培养瓶底部出现的小黑点是什么神物啊？多选哦
[打印本页]
作者:
yuhaoze
时间:
2012-10-18 19:08
标题:
细胞培养液中、培养瓶底部出现的小黑点是什么神物啊？多选哦
最近养细胞，不管换液的时候怎么洗，第二天在培养液中都会出现小点点的杂质，另外养293T的时候，传代后细胞液很脏。不管是在咱们网站还是丁香园等等的，看到大家对这个东西讨论甚多，有黑胶虫论的，有支原体论的，也有碎片论的，从参与度可以得知，很多很多人深深地被这个问题困扰着，但这个到底是什么一直没有一个公认的答案。
7 ]0 `/ R8 s+ ~" a" Q' @. \7 n" f
大家参与投票吧，选项肯定不全，大家对这个问题还有什么解释，就在下面留言吧
作者:
mansnoopy
时间:
2012-10-20 10:53
应该是细胞碎片，你要用percol分一下。
作者:
xulijunji
时间:
2012-10-20 20:23
就是黑胶虫啊
作者:
刘森泉
时间:
2012-10-22 18:00
而且会动，但又不是污染。很奇特。
作者:
liuyul03
时间:
2012-10-23 16:12
如果是血清当中的，那把培养皿中放上培养液，然后放在培养箱中过几天，看看有没有。我是没见过，反而培养细胞的时候出现了。个人认为是细胞代谢物。
作者:
zhanglei1414
时间:
2012-10-23 23:05
任何大的细胞碎片或者较大的蛋白颗粒在培养基中都会做自由运动，叫个啥现象，忘了
0 i/ ^7 y$ h/ E( M2 V- L7 c2 R
因为显微镜焦距的原因，眼睛看见的就是黑点
q( x9 T6 g/ w A5 h. H$ c) G6 @+ l
而且还会自己摆动
" E0 _5 E- n# m$ m
想看污染没有很容易，一看颜色非常黄，污染了。二看非常浑浊，污染了。三镜检。四做细菌真菌支原体培养。
作者:
坏蛋蛋阿布
时间:
2012-10-24 12:33
你想说：布朗运动？
7 a* e$ t3 C: y* \- f, A
我培养是在细胞大量死亡的时候会看到小黑点，如果是细胞量很少就看到小黑点的话就不知道是什么了……
作者:
yanjie11678
时间:
2012-10-25 17:04
回复
yuhaoze
的帖子
: J+ V& ?+ A3 J
; J8 [2 C' F {* `% s
我认为是支原体污染，短期实验对细胞影响不大，如果是长期实验如iPS 诱导，影响很大。如果细胞比较珍贵可以加杀支原体的药，推荐用Lonza 的，普通的细胞直接扔掉好了。
作者:
yuhaoze
时间:
2012-10-25 18:21
回复
yanjie11678
的帖子
+ Y6 r* A5 y1 E
0 h' T/ {! O- L. n
好的谢谢！
作者:
86964109
时间:
2012-10-29 09:15
我们用PCR检测，感觉有支原体污染的可能，但不是绝对
作者:
hjd8886
时间:
2012-10-29 11:45
师姐说是细胞碎片，因为不透光，所以是黑色的！
作者:
xuehu20
时间:
2012-11-6 17:11
回复
zhanglei1414
的帖子
$ w/ L$ R5 G. P- [0 C
X' Q+ j/ D+ X
你说的是布朗运动吗？
作者:
zhanglei1414
时间:
2012-11-6 22:10
回复
xuehu20
的帖子
6 M* t* E" ?+ l' m, U
' ^( L; n( ?9 ]
是的，就是布朗运动，血小板在培养基里也是不停的在做晃动，像虫子一样，哪有什么黑胶虫啊，那些东西除了污染就是碎片
作者:
labghost
时间:
2012-11-14 15:33
回复
zhanglei1414
的帖子
$ K, u) I2 a) \" s
& ~+ w- O7 k7 M3 V$ B0 F- U4 s
哥，布朗运动。
作者:
labghost
时间:
2012-11-14 15:35
算了吧，有钱直接去搞电镜，再找个寄生虫或者病理的高手一看，就知道这消化不良的玩意儿到底是什么了。
作者:
mhqh
时间:
2012-11-15 22:46
去看看透射电镜吧，应该不贵吧，不过我不确定这样制样怎么制，细胞制样的话，要加固定液然后切片的，你可以取那黑色的东西滴到电镜铜网上制两个样，其中一个加固定液……还有，制样的时候，如果不加固定液然后切片，记得滴了之后把铜网上的液滴吸掉……
( m {( `$ {8 ^$ I* ^
另外，听师兄说，癌细胞在体外反而比正常细胞容易死，死了之后现象包括会出现黑点什么的脏东西，会不会楼主的细胞死了？
; t) r# L, d9 S
新人，不太专业，以上仅供参考，见笑了……
作者:
Donnies
时间:
2012-11-27 09:33
国外称其为黑胶虫，国内一般称其为支原体，但是我有看到一篇详细介绍说，实际上支原体很小，在普通显微镜下根本看不到，但是不太可能是细胞碎片，细胞碎片的话传代会消失的，而且那个黑色的东西会越来越多，一直到细胞挂了，应该是支原体吧，长的比较快，至于国外叫做黑胶虫，我觉得都一样，没必要一定要弄清它到底是什么，做实验的时候注意无菌操作，就可以尽量避免这种微生物的存在。
作者:
1101536053
时间:
2012-12-8 15:12
今年估计公布不了，没有几天了
作者:
zhu-fu
时间:
2014-4-8 10:40
如果是黑胶虫污染的话，很多情况下都是假的胎牛血清惹得祸，最近做实验遇到这样的问题，才发现是GIBCO
胎牛血清
的问题
作者:
922922922
时间:
2014-4-8 12:07
回复
yuhaoze
的帖子
% c+ T. @! Z/ z5 W8 T
) E4 t& X) ?, j$ x3 A
我们的经验是如果这些黑色的小点，随着细胞的生长不断增多，而且细胞也逐渐死亡漂浮，那么很有可能就是黑胶虫了。但是 有时，换液后这些黑色小点就明显减少，而且不再增加，应该就是细胞碎片的布朗运动了。
作者:
lic126
时间:
2014-4-8 15:31
个人不觉得是支原体。。。因为我们一般细胞的培养液会送相关检验，CTUU，也就是支原体衣原体，至少现在没出现过阳性结果。但像这种小黑体现象却偶有发现，个人感觉还是血清批次的差异或者细胞碎片。。。但一般不影响前几代细胞的生长，之后往后传，没具体针对着实践过。
作者:
Latina
时间:
2014-4-18 10:14
我也遇到过这种情况，问老师说没事，但是我很担心，因为是筛选稳定细胞系的过程中，不然得重头再来。里面的黑点看着有时候还在动，我于是每天拿PBS洗2-3次，洗了大约一周后就好很多了，后来就没有了。
作者:
l19rna
时间:
2014-6-15 22:21
我无血清培养基养的human ES也出现小黑虫啊！细胞又比较宝贵，怎么去除比较好啊
作者:
jojo1988509
时间:
2014-6-16 12:38
会动就是黑胶虫啦！
作者:
922922922
时间:
2014-6-21 10:49
回复
yuhaoze
的帖子
- o% \2 ^* M3 {' V( N6 a
0 H8 K0 Y$ L& }7 R) k
是黑胶虫的可能性很大。我记得有一种试剂，可以专门去除黑胶虫，而且一旦处理后就再也不会生长。
作者:
baicaikua
时间:
2015-5-26 17:36
我始终认为是消化的时候损伤到细胞，应该是细胞碎片和凋亡的细胞，特征是污染物比细胞小，且形状不规则，静止时不会移动，偶尔有大片是碎片聚集的情况。
1 `: c$ g' G: t
换液后无法清除干净，但会减少很多，但继续培养又会增多。
% E* p% E. p$ `$ b+ ^; {) P b
黑胶虫一般是比较小的，形状有一定规则，且会移动。
+ @8 P) i' Z8 G
支原体的话一般是细胞生长缓慢，但是培养液里没这么多脏东西。。。
作者:
yuanyecat
时间:
2015-5-26 18:02
小黑点可能是黑膠蟲啊，你用高倍顯微鏡看看啊
欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)
Powered by Discuz! X1.5