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标题: 求助！玻片细胞贴壁问题！ [打印本页]

作者: Tim 时间: 2012-10-23 11:46 标题: 求助！玻片细胞贴壁问题！

本帖最后由 Tim 于 2012-10-23 11:48 编辑 $ T5 z) \- |6 Y2 s" I1 `; [
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我最近想鉴定我养的神经细胞！拿24孔板养的！但是细胞不往玻片上贴壁！玻片周围长的很满！希望大侠给点建议！经验！玻片多聚赖氨酸处理过10min！

作者: jhu132llh 时间: 2012-10-23 12:33

本帖最后由 jhu132llh 于 2012-10-23 12:33 编辑 % ~5 e( _) T. x7 T# W! {6 ]7 Q

接种的问题
接种的时候应该是先铺玻片然后接种细胞
因为有些细胞是不喜欢主动爬上玻片的

作者: quge_00 时间: 2012-10-23 13:05

本帖最后由 quge_00 于 2012-10-23 13:06 编辑 5 U0 R5 `+ ]4 [+ u8 _
" d' n3 X4 k+ \# I0 W5 i# _ u
回复 Tim 的帖子
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1、先在孔内铺好灭菌玻片，确保玻片干燥；8 [+ }' |) D) h0 M) i6 z' `
2、消化细胞，新鲜培养基重悬细胞；. q, _( y4 V$ F
3、细胞悬液滴在水平放置的玻片上，利用液体表面张力的原理，
小心勿使悬液流出玻片边缘流到孔内，培养箱内或超净台内静置一段时间- \: m n4 O u* o8 C
（具体看细胞种类，几分钟到半小时应该会贴壁了吧）
4、贴壁后，孔内加入培养基，要避开玻片，小心冲掉细胞~

作者: Tim 时间: 2012-10-29 17:39

回复 quge_00 的帖子" |( Y H) [. K9 B

方法极好！非常感谢！

作者: 小渝 时间: 2012-10-30 15:37

回复 Tim 的帖子; z# c/ y% F2 Q# z) B0 \

我用的是先将玻片包被，然后自然风干，放于需接种的板孔了，然后根据所养细胞培养体系重悬细胞，浓度较大，然后滴于玻片中央，小心倾斜使培养液覆盖完整张玻片，避免流出玻片，最后在培养箱培养，各种细胞贴壁的时间不一样，我的细胞需要24h后贴壁才会比较牢固。

作者: Tim 时间: 2012-10-30 16:05

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这样加培养液后细胞！玻片会飘起来的！

作者: 小渝 时间: 2012-10-31 09:43

回复 Tim 的帖子5 Y. c0 W* L# {

不会呀，我总共滴加的培养液就是大概刚好覆盖整个玻片就够了

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