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标题: 关于matrigel的问题 [打印本页]

作者: bubble_w 时间: 2012-10-24 09:45 标题: 关于matrigel的问题

我铺的matrigel是1:20稀释的，铺完之后在镜下观察，会看到很多纤维还有类似杂质的黑色斑点，请问各位战友有否遇到相同情况。事先说明一下，溶胶、配置等过程完全按照操作手册，冰上操作，所有耗材预冷。

作者: pailishi 时间: 2012-10-24 11:02

应该没有

作者: shuishan 时间: 2012-10-24 15:19

偶尔看到黑色斑点，但是不影响细胞贴壁生长。# i% e0 q! N' U/ v; m# j+ p

作者: 开心果王 时间: 2012-10-24 16:07

不知道你说的是不是类似于纤维样的物质，matrigel铺完后会有一层薄纱样的物质包被在板子表面上，比较均匀，操作不当会形成大块的胶聚集物，肉眼都可见。如果你都是按说明书来的话，应该是正常现象。

作者: chentian820 时间: 2012-10-25 15:48

这是很正常的，我的也是这样，hESC在长得没有任何问题。

作者: bubble_w 时间: 2012-10-25 20:32

回复 chentian820 的帖子' A3 K9 i1 X5 K
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我直接把hESC复苏在上面，用的是mTeSR1，干细胞复苏48h后基本没怎么贴啊。

作者: bubble_w 时间: 2012-10-25 20:33

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feeder cell复苏在上面感觉有点皱缩，不知道是不是有影响。

作者: bubble_w 时间: 2012-10-25 20:35

再问个问题。matrigel最多可以多少比例稀释？1:50？

作者: 也行天下 时间: 2012-10-27 07:38

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我们养hiPS细胞，matrigel1:80稀释，细胞贴壁和生长都没有问题。
稀释Matrigel胶的时候，除了按操作手册操作以外，还要注意速度要快。

作者: chentian820 时间: 2012-10-27 14:37

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你的干细胞种子不好，一般复苏效率在10%左右。可能你的就没活的种子

作者: bubble_w 时间: 2012-10-29 09:39

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是用一般常用的matrigel，还是那个hES专用的matrigel？

作者: hjd8886 时间: 2012-10-29 11:49

我们实验室是280ul的matrigel溶于25ml的F12中，用起来还好啊，没有黑点，就是有时候会些小凸起。

作者: bubble_w 时间: 2012-10-29 13:30

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是hES专业的胶吗？

作者: hjd8886 时间: 2012-10-30 14:04

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q' C+ U' b# |. ~5 G0 v# \% l
是养hES的专业胶，好像是RD公司的。

作者: bubble_w 时间: 2012-10-31 13:39

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5 ^7 e' a$ ~. B$ S
非常感谢

作者: hjd8886 时间: 2012-10-31 14:10

回复 bubble_w 的帖子

不客气啦，共同进步嘛，呵呵

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