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标题: 外周血淋巴细胞分离 [打印本页]

作者: jiguojie87 时间: 2012-10-30 11:27 标题: 外周血淋巴细胞分离

外周血淋巴细胞分离过程中的稀释比例具体多少为宜？

作者: 小呵呵 时间: 2012-10-30 12:46

最好1:1稀释

作者: deshenglll 时间: 2012-10-30 13:43

大多情况下是1:1稀释的，要是血液比较粘稠的话可加多一点。

作者: wwxx66 时间: 2012-11-10 16:26

先分离出来血浆再加生理盐水稀释，一般15-20ML的血细胞加30-40mL的生理盐水。这样分离出来的白膜层红细胞的含量小。

作者: zuming 时间: 2012-11-12 14:00

视血液情况，1:1——1:2都没有问题

作者: stang198651 时间: 2012-11-12 15:54

一般情况下1:1是够了的，血液粘稠、红细胞压积高的，增加一点稀释倍数，以降低红细胞密度，提高梯度离心的回收率。若分离细胞的量比较大的话，可以考虑先加羟乙基淀粉沉降红细胞，再梯度离心，这样的回收率会更高，且减少梯度离心时的样品处理量。

作者: cheeray 时间: 2012-12-6 14:11

根据血液粘稠度来决定吧，加入生理盐水稀释一下。。看总体积，再用一倍体积的分离液来分离

作者: stang198651 时间: 2012-12-7 11:23

我听说和见过不稀释的，效果还行，如果血液太多的话，可以一试，可以省时省力很多。

作者: easternliu 时间: 2012-12-7 12:51

1：1生理盐水稀释的，稀释应该还是有点必要吧。不然太粘，分离出来有红细胞，死细胞在里面不利于细胞的生长，细胞死亡，内溶物释放又会导致其他细胞死亡，恶性循环

作者: hwlightning 时间: 2012-12-11 08:22

如果采集100ml人外周血，你离心收集血浆后，再加入DPBS重悬至100ml，然后加入到淋巴细胞分离液离心分离就行。基本上也就是1:1

作者: xgl200 时间: 2012-12-11 08:46

我分离外周血和骨髓里的有核细胞比例为：血：培养基：淋巴细胞分离液=1:1:2

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