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标题: TetO-慢病毒表达系统的包装质粒是什么? [打印本页]

作者: kephort    时间: 2012-11-11 17:19     标题: TetO-慢病毒表达系统的包装质粒是什么?

本帖最后由 细胞海洋 于 2012-11-11 17:35 编辑   r3 I) y# n5 x) F( T6 X6 [

5 t' ~' ?% z2 @) S# l  Y请问有做TetO-慢病毒诱导iPSCs的吗?
9 O. ?+ T3 a+ \, u# E7 t, X4 O
; J) P& x' j2 ~# T4 {7 F7 j+ ^Protocol中:For each 10-cm plate, use 10 μg of FUW-tetO-cDNA (Oct4, Sox2, Klf4 or c-Myc) lentivirus backbone with 2.5ug of pMD-G and 7.5 μg of pPax2.
" Z6 n2 X. [( |# S+ r% }, g# k问题1:里面的包装质粒:pPax2是“Plasmid 35002: Pax2”还是“Plasmid 12260: psPAX2“?两者有什么区别啊?附图:
! o  i  N3 j2 W- E( m7 X以下图片点击可以放大
" R9 S: B! ?& }8 {  F[attach]47346[/attach]
) ]( `- `; ^$ }% N' c/ E问题2:而另外一种包装质粒pMD-G指的是”Plasmid 12259: pMD2.G“吗?附图:! |( {% R5 ~. y& p4 t3 x* l; V5 U  H
[attach]47347[/attach]6 h  _. [2 q& _4 }- w' [$ R. `
pMD-G与pMD2.G有什么区别吗?$ j$ J8 p, K* [1 F, X

% h6 z( \' q( v- ^( N& m; V问题3:这两种质粒都可以用于慢病毒的包装吗?有没有什么影响啊?% ^, c# Q2 `% V9 [

' ~4 ^; a3 A6 Y, B问题4:还有一个质粒:Plasmid 20342: FUW-M2rtTA,这个对于四环素诱导也是必需的吗?也要一起包装吗?附图:
+ J) K+ l% ~! f2 T* }% _( k% z$ }" w[attach]47349[/attach]
: ~( \  j3 W; A; ~, o# Y* u, \4 ?
6 ^, g5 b! l6 S' V请知道的朋友帮解释一下。非常感谢!
作者: fwj81    时间: 2013-3-1 09:45

请问后来楼主用的是什么质粒,还有病毒都是购自哪个厂家?是有包装好的吗?我刚接触ips,希望指教,非常感谢。
作者: chenhuachen    时间: 2013-12-6 17:57

小弟现在做p53对转化细胞代谢的影响,急求TET四环素诱导的wt-p53质粒,对接下来的实验非常重要,跪求论坛里的园友谁有这个质粒,可否赠小弟一点,不胜感激!4 H5 P0 d; X0 F6 V: x# V
人的或者大鼠的野生型p53都可以。




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