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标题: 估算细胞数目的简易方法,大家一起出力 [打印本页]

作者: zhangtcm    时间: 2012-12-4 21:31     标题: 估算细胞数目的简易方法,大家一起出力

我计数板用不来,实验室又没有细胞计数器,估算细胞数目的方法,培养细胞时需要估算细胞数目,除了计数板及细胞计数器,比如说根据显微镜下的数目,或培养瓶中的汇合度,来大致估算细胞数目,大家齐心协力一下,我先引一下。
' i% G& R* Q0 Q/ y" b/ E1 Z100 mm培养皿 人成纤维细胞, 80~90% 汇合度,大约  2 x 10^6 个细胞
作者: cochongg    时间: 2012-12-4 23:26

估算要建立在实际细胞计数的基础上,长期积累的经验,估算值才会越加接近实际值。
% |  h) }# \* ~2 f, U* X$ E( `2 v
所以大家要估算细胞数要在培养细胞时/ Q) p1 Q. |. k: t
根据自己使用的培养容器面积大小,细胞类型,以及细胞覆盖面积等! \# z' o% Y6 p
多观察。
: \7 z- ?. u6 M$ O7 A5 R$ j2 e( ]1 x% f- i/ o( O- c
还是先弄个细胞计数板玩玩
作者: zttamy    时间: 2012-12-5 09:39

即使是细胞类型相同在不同生长状态达到相同融合度,细胞的数量也会不一样的,所以还是多用下计数板吧,计数板的用法,百度一搜到处都是,蛮简单的
作者: xgl200    时间: 2012-12-8 09:40

融合80,90,100都是靠你估计的。要准确还的要计数板。
作者: sdfengxuan    时间: 2012-12-10 10:08

细胞类型不同、生长状态不同、融合度不同,太多主观客观因素,估算不靠谱吧!还是计数板!
作者: tanguixiang    时间: 2012-12-10 10:44

用75%酒精 4度保存一段时间,所有样本收好,过流式细胞仪
作者: bloodroses    时间: 2012-12-11 09:48

如果接种或传代的密度对培养影响不大的话,可以用目测的方法判断细胞密度,但这也需要不断的经验积累才行。
: F3 d, Y- l" {" e, F  x/ C5 P最简单可行的还是用计数板吧。哪怕数一个格也行啊,总比目测来的准确些。
作者: Donnies    时间: 2012-12-18 15:09

最好还是计一次数吧,这样就可以根据 密度判断细胞的数量级,或者根据差不多大小的细胞的相同密度进行估算
作者: shy8610    时间: 2012-12-20 10:42

计数板用不来?楼主很幽默,一般来说,除了那些自动计数仪以外,计数板是最常见的,而楼主想要以这种方法估算细胞,我实在不敢苟同,不知是不是现在的年轻人是不是喜欢寻求更简单的方法,还是建议使用计数板吧,其他的都是浮云,实在不会,百度一下方法即可,而且学过细胞生物学的,没有不会的
作者: labspring    时间: 2012-12-20 11:15

个人觉得没有用不来的,只有懒得用的。只靠目测估算是完全不准确的。严谨的科学态度是科学研究必须要有的。
作者: wind789    时间: 2012-12-20 11:52

zhangtcm 发表于 2012-12-4 21:31 $ V/ x0 G  \  J( t$ w
我计数板用不来,实验室又没有细胞计数器,估算细胞数目的方法,培养细胞时需要估算细胞数目,除了计数板及 ...

) i3 P0 M3 ~0 Y" W8 ]3 Y4 ]" c计数板用不来??啥米情况??
作者: easternliu    时间: 2012-12-20 12:07

成纤维细胞和楼主差不多,T175,4*10的6次方。部分肿瘤细胞T75就能达到这个数量,甚至多很多
作者: fengxiwu    时间: 2012-12-21 13:08

回复 zhangtcm 的帖子
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0 t4 m0 S) Q, v* W成纤维细胞的尺寸是多大:长度,半径直径等等。  100mm的培养皿10的6次方还是10的5次方细胞?数量级可是很关键的。
作者: fengxiwu    时间: 2012-12-21 13:15

回复 sdfengxuan 的帖子! N, b# s% W! d8 I

1 l2 T! L/ w! ?3 `% L& Y说的很对。据我养细胞的经验,细胞的大小对密度影响太大了,普通的细胞株细胞大小在10到20微米左右,六孔板中都能达到10的6次方。而骨髓基质细胞,通常认为的间充质干细胞,因为细胞长度甚至可达150微米,胞体大小就不说了,就算是在六孔板中100%融合,能达到10的5次方就不错了。
作者: deshenglll    时间: 2012-12-24 11:21

分类而定吧。细胞不一样就不好估。做多了就知道了。经验性问题。看离心下来的细胞沉淀物也能大概的估算细胞数。




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