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标题: CIK细胞是否污染了？ [打印本页]

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作者: zhuzhentulip    时间: 2012-12-16 21:47     标题: CIK细胞是否污染了？


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, z, j% j2 F& N; c. {+ G    图1和图2 我怀疑是真菌污染，但我取了部分培养物出来离心沉淀后涂片，进行革兰染色，却没有看到有真菌，然后又取部分培养物进行细菌培养，分别接种在一个血平板和一个沙保氏培养基上，5天后都未见细菌生长。图3和图4是我半换液后第二天观察时看到的情况，此时未见图1和图2中的成串的圆的像真菌一样的东西了。
+ F0 r+ E& E& x" U7 w* D- e   请问大家这是不是真菌污染，如果不是污染，那东西又是什么呢？
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1 C; e$ w5 B7 ?% \% V+ s7 ]图4
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作者: stang198651    时间: 2012-12-16 22:36

回复 zhuzhentulip 的帖子, ]7 L0 Z1 e5 M1 V
1 p" X6 x" T% y# d* ]
我觉得是血小板，血小板凝集在一起，不是细菌污染，早期能看到，后期就裂解死亡了，就看不到了。如果是污染，图3和图4中一定能看到，且会更多。

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作者: 大少爷    时间: 2012-12-17 08:21

不像
6 r) z- l8 W) y! @8 H

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作者: hwlightning    时间: 2012-12-17 08:23

如果是真菌污染，你得细胞状态会很差。

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作者: jiguojie87    时间: 2012-12-17 09:51

不是污染

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作者: jenvy121    时间: 2012-12-17 10:27

，你的细胞是刚刚培养的吧，明显的血小板，你换液低速离心后比较轻的血小板就不见了，不过你的细胞还是挺脏的，还是要低速离心换液好一点，要不死细胞碎片影响细胞生长

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作者: yinfuhua    时间: 2012-12-17 10:39

回复 zhuzhentulip 的帖子" V4 y( ]' \0 f: d+ J

9 i! G9 y0 I7 H+ [: ?3 w请问图1图2的照片是培养几天拍的？如果是血小板，做革兰氏染色应该可以看到的。血小板折光性没有这么强（不会这么亮，与血细胞的亮度差不多）。

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作者: lyj-0017    时间: 2012-12-17 10:42

不像细菌和真菌污染。真菌的菌团不会这么多且小；细菌污染的话，培养基会看到很明显的浑浊。应该就是战友们说的血小板，培养后期一般就会自动裂解死亡

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作者: wjp130    时间: 2012-12-17 11:52

真菌污染会看到菌丝，像杂草一样生长，有时候会看到孢子，

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作者: suning5    时间: 2012-12-17 12:33

第一，如果是污染的话，是葡萄球菌感染，是细菌，而不是真菌。第二，从大小来看，很可能是血小板

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作者: zhuzhentulip    时间: 2012-12-17 22:36

谢谢你们的回答，应该不是污染了，如果是污染的话，细胞早就死亡了。不知道是不是血小板了 因为图1和图2 是第8天照的，前几天没有这种东西。有人说可能是脂滴，像不呢？

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作者: zhuzhentulip    时间: 2012-12-17 22:39

回复 yinfuhua 的帖子3 t7 y3 b% a3 s. e3 Q

( D! g6 h  c+ N( I  D- C5 C3 j谢谢你们的回答，应该不是污染了，如果是污染的话，细胞早就死亡了。不知道是不是血小板了 因为图1和图2 是第8天照的，前几天没有这种东西。有人说可能是脂滴，像不呢？

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作者: zhuzhentulip    时间: 2012-12-17 22:41

回复 jenvy121 的帖子
# |- V: {, n- B" i9 k# x8 W% d& x% e( [
怎么低速离心换液啊？离心力多少？洗几次？

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作者: yinfuhua    时间: 2012-12-18 00:00

回复 zhuzhentulip 的帖子
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: O9 m5 O$ K5 W% A% R这个亮度确实和脂肪滴（球）的折光度很像。

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作者: bloodroses    时间: 2012-12-18 19:49

看着不像污染，$ K1 m7 {  v0 b/ a
建议如果重新分离细胞培养时，可以多洗涤两遍，
! v6 ^# _) f: P2 P* J+ C3 s根据细胞情况，隔天半量换液，这样看起来应该就会干净些的。

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作者: zhuzhentulip    时间: 2012-12-18 22:10

回复 bloodroses 的帖子5 B& U8 |. a* c/ e7 d

* K1 z+ _/ ~6 Z就是

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作者: zhuzhentulip    时间: 2012-12-18 22:10

回复 yinfuhua 的帖子
, F+ L! u! y2 Q# _$ f3 V- E$ f7 d. d3 m
是的

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作者: bloodroses    时间: 2012-12-18 22:28


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回复 zhuzhentulip 的帖子
+ `! K; _4 _4 c9 @% C) [+ {3 R* x. S! P! B: x( R0 J" f
离心换液时，我是用90g离心5分钟的

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作者: zhanglei1414    时间: 2012-12-19 23:03

污染没污染看培养基颜色和浑浊度就能看出大概

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作者: zhuzhentulip    时间: 2012-12-20 21:45

回复 zhanglei1414 的帖子
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细胞数量多了以后培养液隔天就会变黄的啊,也会有颗粒,也是浑的啊

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作者: zhuzhentulip    时间: 2012-12-20 21:45

回复 bloodroses 的帖子2 N3 u0 ?& F- Z0 ?% m
" q' x/ |; L+ _0 |, y. r
那转速只有100多了,是不是?

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作者: bloodroses    时间: 2012-12-21 19:43

回复 zhuzhentulip 的帖子
) Z$ v! B7 X3 n6 e: O7 `+ o1 o4 D4 s& v, ]( T% E7 @$ j7 _
这个要根据离心机的具体情况而定了
# N/ w) I& P6 [5 Z+ b' X如果离心半径比较大，那么转速就低一些。

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作者: xu_shufen    时间: 2012-12-25 07:32

是真菌污染，此种细菌有一个特点，它的生长不影响细胞生长，只有细胞菌长到一定程度时才影响细胞生长，且成串生长类似葡萄状，是真菌的一种酵母菌。你可进一步鉴定。

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作者: kiss2346    时间: 2013-1-7 08:57

个人觉得是血小板可能性很大，前几楼低速离心的建议不错，可以采纳

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作者: easternliu    时间: 2013-1-9 13:46

bloodroses 发表于 2012-12-18 22:28
! `* |$ D: @  r) C: S* T3 D回复 zhuzhentulip 的帖子
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离心换液时，我是用90g离心5分钟的

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CIK细胞这么小，90G？我们都用的600G离心的，这差距太大了吧

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作者: echono    时间: 2013-3-10 22:24

应该不是污染，正常的。放心好了，

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作者: flys100    时间: 2013-3-11 13:51

确定不是污染，目测是杂质，后两个图看起来，质量很差吧。

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作者: 漂泊的风    时间: 2013-3-18 11:23

不是污染，没事的，细胞挺正常的

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作者: realff    时间: 2013-3-29 16:16

回复 zhuzhentulip 的帖子5 n+ Y3 p; W2 T
7 p1 s& F1 X/ c1 o- n" x
我也认为可能是脂滴哦，以前也为这个怀疑过。当时认为这种杂质来自血清，然后就单独拿加了血清的培养基和空白培养基做对比，都放进培养箱。发现加了血清的培养基逐渐出现杂质，越来越多，检测也没有染菌。同时另一瓶没有出现这种情况，所以我判断很可能是脂滴之类的。

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作者: 雁南飞    时间: 2013-3-29 16:35

是不是脂滴

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作者: hotcell    时间: 2013-3-30 14:28

有可能是支原体或衣原体污染

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作者: zhuzhentulip    时间: 2013-7-9 20:17

回复 realff 的帖子. F# P& p- k- l6 n
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我也这样认为，加血清的培养基逐渐出现杂质。

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作者: mtdj1314    时间: 2013-12-11 13:50

回复 stang198651 的帖子
  L- j$ N% K% T; L4 G8 L6 c1 b: h) r$ W
你好，我想问下，CIK早期培养时看到很多黑色，似乎杆状，能动的，是血小板还是污染？培养基颜色变化不明显，轻轻晃有沙状物，显微镜下可见很多比细胞小的杆状物，颜色深，细胞本身透亮，似乎没有受影响。那这是血小板还是污染？

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作者: 孙帅帅    时间: 2013-12-13 14:52

革兰氏染色  能染真菌？

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作者: 星空雾雨    时间: 2013-12-27 15:21

回复 easternliu 的帖子: J2 ]5 n2 z# _0 O# m
0 Q6 y9 y$ m9 p% {
不是用2000rpm的转速吗    差距这么大吗  你们的转速是多少

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作者: easternliu    时间: 2013-12-30 09:48

星空雾雨 发表于 2013-12-27 15:21
+ R4 ^8 m' x' z回复 easternliu 的帖子
. c$ |8 E3 A. _, [1 N
; J2 v  z7 b. m( o不是用2000rpm的转速吗    差距这么大吗  你们的转速是多少

/ _  D& M: N$ q$ C不同离心机讲转速是没意义的，离心力是转速和半径两个因素决定的，同样的2000rpm，在你那儿可能是400g，在我这儿是700g，所以和别人交流的时候，我们一般不说RPM。之前我说错了，我们离心一般是 300g，10min。

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作者: zhuzhentulip    时间: 2014-5-31 00:16

回复 孙帅帅 的帖子
0 c1 h: `/ V. N7 O9 \# ]3 E$ y4 W) U
革兰氏染色当然可以染真菌了 真菌为紫色 革兰阳性

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作者: zhuzhentulip    时间: 2014-5-31 00:17

回复 星空雾雨 的帖子
# W3 s4 l$ O; r& W4 o2 _- ?1 K( e  p- r' c0 _5 l
要看相对离心力 离心机不同 相对离心力也不同 分单核细胞的时候我们用的离心力是600g

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作者: yj729506    时间: 2015-11-9 13:37

请问你的这个情况解决了吗？

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作者: zhengjianwei521    时间: 2015-11-9 14:55

应怪不是，你这是刚培养的吧

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