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标题: 脂肪诱导用吲哚美辛如何溶解 [打印本页]

作者: xuzhijuan1989    时间: 2012-12-18 23:27     标题: 脂肪诱导用吲哚美辛如何溶解

购买的sigma的吲哚美辛,用于脂肪细胞诱导,不知道如何溶解,想请教下大家,谢谢!
作者: ditiger    时间: 2012-12-19 00:01

IDM, 分子量357.79 称取89.45mg 溶于5mL 无水乙醇中,0.2μm无菌滤膜过滤后,配成50mmol/L的储存液,-20℃冰箱保存。
作者: jensn    时间: 2012-12-19 09:57

我对2楼的回答有点疑虑:吲哚美辛在丙酮中溶解,在乙醇、甲醇、氯仿或乙醚中略溶,在苯中微溶,在甲苯中极微溶解,在水中几乎不溶。既然再乙醇中是略溶,为什么还用乙醇来溶解,再者,称取89.45mg可不是那么容易的事情,计算你有很精密的电子天平,这称取在转移的过程,可能导致的误差已经不能保证终浓度了。我们的做法是:吲哚镁锌:粉剂sigma17378-5g,储液配置:加2.23ml DMSO溶解成浓缩10000倍的储液1,1ml储液1加9ml alpha-MEM配成浓缩1000倍的储液2,0.2μm无菌滤膜过滤分装,-20℃保存,用时直接取100ul加入100ml培养基。一般做诱导,100ml的诱导液是足够了。
作者: xuzhijuan1989    时间: 2012-12-19 20:42

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我今天用DMSO溶了,5g加了6mlDMSO才溶解
作者: jensn    时间: 2012-12-20 09:10

如果加了6ml,你要注意稀释的倍数了,不然终浓度可能会偏差比较大,不过每个实验室诱导的浓度也有差异。只要你能做出想要的结果就ok!
作者: xuzhijuan1989    时间: 2012-12-21 22:09

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呵呵,好的,谢谢!
作者: huangcong1988    时间: 2013-11-20 20:15

回复 jensn 的帖子$ A8 W9 K% B+ `
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楼上的方法很好!但是5g全部溶解到2.23mlDMSO中真的还是比较难,所以我还是称量,0.358g粉剂,用10mlDMSO溶解,虽然称量过程中可能有误差,但是也没办法,不然5g吲哚美辛得用到什么时候啊?
作者: huangcong1988    时间: 2013-11-20 20:15

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: g- W4 Z/ s* v* ?$ u) i4 O还有就是我的吲哚美辛用DMSO 溶解之后没有过滤
作者: jensn    时间: 2013-11-24 01:25

具体是先称量还是一起溶解,看个人的需要准备吧,我当时完全溶解是基于保证浓度考虑,分装后做好标记,溶解后置于-20°长期保存也不会影响其使用。如果你觉得称量更好,也未尝不可,本身吲哚美辛的浓度不是卡死的,做成脂诱导相对来说还是比较容易。




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