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标题: 为什么要对质粒进行酶切检测？ [打印本页]

作者: yuhaoze 时间: 2013-1-12 14:52 标题: 为什么要对质粒进行酶切检测？

为什么提取出来质粒要进行单酶切、双酶切？大肠杆菌培养时间长了质粒大小会变化吗？

作者: w343989328 时间: 2013-1-12 21:57

会发生重组，看酶切图谱只是大概地检查一下

作者: yuhaoze 时间: 2013-1-12 22:04

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我想看看这种重组的资料，您那里有吗？

作者: 军医 时间: 2013-1-13 08:54

有时候要的时间长了，这种重组发生的概率不大吧，平时多摇一会好像对结果影响不大。

作者: lazyworm 时间: 2013-1-14 12:46

酶切只是初步的验证，酶切发现大小一致的话，就要测序了，测序结果对的话就成功了。

作者: daviddow 时间: 2013-1-14 23:19

酶切证明啊

作者: weiyepan 时间: 2013-1-15 02:33

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额，现在摇质粒用的一般都是DH5a来源的host，重组的基因都被敲除了，例如RecA等。
质粒变短倒是有可能，一般发生在大质粒上比较多（10K以上）。$ L7 l1 b8 c) A
酶切鉴定只是确定你的菌种没有污染而已，一般不会有什么问题。

作者: yuhaoze 时间: 2013-1-15 10:45

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- f2 s! s* u8 U1 d1 ?
谢谢！

作者: huangcong1988 时间: 2013-1-15 12:26

我们一般做双酶切，单酶切不做，做单酶切意义不是很大。做完酶切之后还要测序，酶切只是初步鉴定，测序对了才行

作者: flybear 时间: 2013-1-15 16:35

酶切可以确定其位点没有突变！！！这个很重要，有些是转进去了，但是可能没有整合进去，也可能是整合进去了，但是发生了突变！！！

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