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标题: 求救脐带间充质干细胞----细胞成团 [打印本页]

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作者: zhanghaifang    时间: 2013-1-15 20:20     标题: 求救脐带间充质干细胞----细胞成团

我养的间充质干细胞是脐带来源的，原代培养的前两三天细胞贴壁很正常，形态也挺好的，但是到第四天就不对劲了，细胞都聚集在一块，形成了一个个的细胞团，请大虾们给点意见8 X! A/ {8 S; L! R7 `& C) m
  

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作者: 细胞海洋    时间: 2013-1-15 20:53

建议你上图

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作者: wind789    时间: 2013-1-21 15:17

我也碰到过。有一段时间做出来特别容易聚团。过了那段时间，聚团这个现象又重复不出来了。

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作者: 湖南干细胞    时间: 2013-1-22 09:24

回复 wind789 的帖子
; \+ Y9 R" J5 j9 U) A6 o. T  e* m, j4 V7 ?
请教做脐带间充质需要用那种酶，多少浓度？我们实验室有胶原酶二型的粉末剂，应该怎么配，

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作者: wind789    时间: 2013-1-22 09:33

湖南干细胞 发表于 2013-1-22 09:24 % |3 X: F5 s) y/ t
回复 wind789 的帖子4 O1 v( o4 {1 u% w5 z
3 N1 `) S5 B1 U
请教做脐带间充质需要用那种酶，多少浓度？我们实验室有胶原酶二型的粉末剂，应该怎么 ...

: w5 s7 M1 d- ?我一般不用酶，直接组织块贴壁培养。

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作者: 笨球球开心    时间: 2013-2-1 18:55


- h5 G1 \* ^7 E: i- d+ }# `  B: A+ D/ y/ E& E* f% P
回复 wind789 的帖子
, l1 Y. |3 y* A- \" ]+ k$ e! C8 v* X' Z4 y& q6 v, h
步骤是怎样？？

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作者: bsx1111    时间: 2013-2-1 19:07

我也成团，不知道是什么原因，我用的是无血清培养基，你用的是什么培养基

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作者: lovesxj941    时间: 2013-2-2 16:55

回复 bsx1111 的帖子* n9 C6 I" B7 h* l8 `2 v* L

* p# N0 Y9 Y( p7 l- w4 A! \用无血清培养基培养原代细胞 聚集成团一般原因是营养缺乏。建议换有血清。

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作者: bsx1111    时间: 2013-2-2 20:26

回复 lovesxj941 的帖子$ Q7 X7 n1 k3 r" }( {3 X0 O

# l& x* Y. p8 O% s2 M" V2 o怎样培养才能使无血清培养不成团啊

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作者: wind789    时间: 2013-2-4 09:29

笨球球开心 发表于 2013-2-1 18:55
1 l/ |+ r6 e0 Y  I& S8 I) H8 I" m; O回复 wind789 的帖子
5 v7 K/ ^% z+ F- X9 E4 a: U  V$ m; t: Z# m! p! b- p* p- O* N
步骤是怎样？？

9 }3 R( [- [' h& e剥离华通胶，剪成小块，生理盐水清洗后与完全培养基混合，转移入培养瓶中。我一般是T75中加入1ml组织块+5ml培养基，尽量晃匀组织块。后面4天换一次液，没污染的话平时不动瓶子，安心等细胞爬出来。

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作者: lovesxj941    时间: 2013-2-4 09:44

回复 bsx1111 的帖子
! a2 X% e. l# K. }
5 C9 K7 r' S0 C# @让细胞密度高一点。然后按照无血清说明书或者更加频繁的进行换液。这样会避免成团。

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作者: bsx1111    时间: 2013-2-4 21:07

回复 wind789 的帖子
' F: I! g2 i" r8 \  P. b" ]! c  R1 q" }  U
你说的完全培养基是什么，有血清吗

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作者: wind789    时间: 2013-2-5 09:07

bsx1111 发表于 2013-2-4 21:07 4 f' A; }. P$ M) o9 e0 o4 c
回复 wind789 的帖子$ F# J0 X( y/ t9 p( B% P* J( `% L) h
! X, k1 [9 D; t: n" ^
你说的完全培养基是什么，有血清吗

0 z/ _' P! s3 K) [含有全部成分的培养基，也可以是无血清培养基啊。

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作者: coffee.cat105    时间: 2013-2-5 10:40

回复 wind789 的帖子
+ s* R. u9 `, U! x0 A1 w" n4 v2 }9 l) G$ ^7 U% a, v# T) B
你这个换液是怎么换，把旧培养基吸出来再加新的进去吗？有没有爬不出来的？

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作者: wind789    时间: 2013-2-6 10:23

coffee.cat105 发表于 2013-2-5 10:40   X0 f% p% [& ?7 S% D+ {, W; }4 I
回复 wind789 的帖子/ ^; W# D  v  C. [3 ^2 J( Q0 U
; V2 n- n& a- `: d1 J: ]
你这个换液是怎么换，把旧培养基吸出来再加新的进去吗？有没有爬不出来的？

9 G# A! P' l" h% Y" S
是的。有部分爬不出来的组织块，看个体差异。但是不会全部都爬不出来。

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