干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 求助大神关于培养MSCs [打印本页]

作者: 沁蓝之城 时间: 2013-1-20 17:06 标题: 求助大神关于培养MSCs

最近打算养MSC,看了一些文献，有的用了分离液然后离心，有的直接就培养了，哪种方法比较好？还有培养基方面什么讲究？希望大神能给出具体的步骤，万分感谢1

作者: 细胞海洋 时间: 2013-1-20 21:16

具体步骤建议先查一下本专区以前的帖子很多这方面的内容

作者: wangling0607 时间: 2013-1-21 09:47

看你养的是什么来源的MSC，如果是兔子和人的，直接全骨髓贴壁就行，小鼠的就比较难养

作者: 沁蓝之城 时间: 2013-1-21 09:48

回复细胞海洋的帖子
+ d" x5 F# J4 a. G/ q# A
我大致看看了大家以前发过的帖子，但是大家的方法好多都不一样

作者: 沁蓝之城 时间: 2013-1-21 09:48

回复 wangling0607 的帖子* x2 h5 W/ J! z! U# T, E7 B: y
# Y+ q) [: ?$ ?$ g! h
唉，我就是要养鼠来源的MSC

作者: yaolinzhang 时间: 2013-1-21 10:45

回复沁蓝之城的帖子( T- z+ `# a" r9 W" ?3 M
' Z: @! D/ V& N
我们直接培养，DMED低糖加血清就行了

作者: qiugt0819 时间: 2013-1-21 11:24

没养过小鼠的，我培养的是小型猪的骨髓间充质，用ficoll离心，澳胎血清

作者: goblinwang 时间: 2013-1-22 18:26

这种鼠源的MSC我正在养，用的培养基是IMDM +20%FBS，至于获得就是取骨髓后直接养，果断时间后换液把悬浮细胞洗去，传个两三代基本就可以了，记得注意无菌啊，原代细胞培养时建议加点双抗& ~+ | r( S" g1 u

作者: 沁蓝之城 时间: 2013-1-27 09:58

回复 yaolinzhang 的帖子; u7 W: ^+ \ w

我也是这么养的

作者: aiweieryezhi 时间: 2013-1-28 16:01

原代培养加双抗，直接培养即可。

作者: 老姜 时间: 2013-2-1 02:00

SD大鼠骨髓间充质干细胞用含10%FBS的LG-DMEM养很容易生长，小鼠则要用小鼠骨髓专用培养液培养成功的概率非常高。

作者: nydfy 时间: 2013-2-1 08:41

如果你希望细胞成克隆化生长，建议用1073分离液（通用公司生产的），如果只是为了得到MSC，组织消化后直接种到含10%FBS，庆大霉素，谷氨酰胺的低糖DMEM中即可。

作者: 沁蓝之城 时间: 2013-2-5 15:11

回复老姜的帖子

我看文献上小鼠也是用低糖的DMEM啊

作者: 沁蓝之城 时间: 2013-2-5 15:11

回复 nydfy 的帖子

谢谢

作者: 老姜 时间: 2013-2-6 11:05

小鼠用LG-DMEM是可以长，但传不上三代就不死也不增殖。若想实验进度快，买专用培养液快快搞定。

作者: 644414915 时间: 2013-2-7 02:06

回复 goblinwang 的帖子

养的是小鼠吗

作者: 644414915 时间: 2013-2-7 02:07

回复老姜的帖子+ }! ~0 H. Q6 k
! v* q3 v5 @, N- M' K- o" f# s
是的吗？我怎么没成功，用了好几种啊，难道是我哪里出错了？4 ~# q( ?% R5 ?5 |, L" A7 T/ n
你有养出来的图片吗

作者: 644414915 时间: 2013-2-7 02:09

回复老姜的帖子

专用培养基，我用了stemcell的和百的都没成功，正在分析原因

作者: 老姜 时间: 2013-2-8 09:49

用STEMCELL 的，细胞密度接种的高些。

作者: 老姜 时间: 2013-2-8 09:50

一定要将产品配套的添加物一同加入* x4 [. a+ T7 v8 u3 }+ V

作者: redmoon610 时间: 2013-2-16 18:35

上边说的也要楼主自己选择，大鼠的好养一点，小鼠难养，我当时养的是C57BL /6小鼠，就是c57，细胞数量少的很，唉。而且当时BMMSCs是荧光小鼠的，小鼠就是一笔大开支。

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)