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标题: 求助 人ASCs? [打印本页]
作者: cartoonyang    时间: 2013-2-1 15:18     标题: 求助 人ASCs?

本帖最后由 cartoonyang 于 2013-2-1 15:19 编辑
) Z) `. f  {& p( X1 E
; i  N! Q+ P" [) c& {- @2 s我们现在正在分离人的脂肪干细胞，目前是在做表型检测。买的是ABCAM 公司的一抗，CD90，CD73，CD105，还有HLA-DR, CD45. 还有买了Invitrogen 公司Zenon 的二抗进行标记，过流式，但是做了很多次（P2-P5代）都检测不出来。由于没有经过检测的人的ASC做阳性对照，目前无法判断我买的抗体是否有效。所以来这里求助大家；另外，如果哪位有经过鉴定的人ASC细胞，如可以赠送更好，如不行，本人愿意购买，以此检测所买的抗体是否失效？谢谢！+ q" C+ E+ B5 v  q. B
作者: wind789    时间: 2013-2-1 15:38

cartoonyang 发表于 2013-2-1 15:18 , G/ [" E8 {+ q
我们现在正在分离人的脂肪干细胞，目前是在做表型检测。买的是ABCAM 公司的一抗，CD90，CD73，CD105，还有H ...
1 A. T. O, \( ^+ ~, x* J
已给站内留言。
作者: cartoonyang    时间: 2013-2-2 10:31

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4 x* l& @4 i; E( ?% w% b" a. e1 v/ v" _) n3 \
非常感谢wind789的热心的回复！！！
作者: ditiger    时间: 2013-2-2 22:17

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& M. C# Y* K, ~4 V. w
) y( `0 G0 ?1 u一般是BD的抗体较好，而且一抗代荧光。5 o) {4 H% {6 Q) b! O' V/ c: m# {" t
ABCAM的抗体不发光么？需要加二抗。。。贴出货号，大家看看。
作者: cartoonyang    时间: 2013-2-5 15:30

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% N. m' u9 t8 `* M4 r' ?. ?' B& f" Y: r, R8 u: w
抗体            货号                   公司
6 e1 Q) M- Q" a" ]$ ]CD105            ab2529                          Abcam
+ Y& Y5 f* v0 z- Z! fCD73           ab81720         Abcam2 W6 @  x& @" v" Y7 _" \6 X
CD90            ab225                         Abcam
' N  t) n8 F% ^% w1 tCD45           ab30470          Abcam
+ U+ o4 `+ B4 fIgG1 control        ab18447        Abcam$ s7 u" e# y: r2 B: S
IgG2a  control        ab91361        Abcam* s6 y. J( m2 K( n3 G
Alexa Fluor488        Z25002        Invitrogen5 h8 ]' @& g, a9 b' Y$ y2 e
R-Phycoerythrin(R-PE)        Z25055        Invitrogen& r; p; W* @1 i. B, e7 P1 P* u

: u# r: O5 |3 B' o检测CD73，90，105都是阴性，真是奇怪。后来问医科大流式细胞实验室的老师，她说，在国内条件下最好用带标记的抗体。
作者: s02260441    时间: 2013-2-19 10:07

下列是我们用的抗体，确认都可以染的出来，我也认为确实是使用自带标记的抗体比较好进行分析。$ w7 P! l0 |& Y- h0 z2 m0 X

9 z0 x5 ]- C9 j4 X3 F! N+ X% uInvitrogen:$ J) k( U+ F. m
IgG1-PE  MG1042 j. z7 w9 l3 q3 w
CD34-PE CD3458104
- K5 ~0 b. v7 ?, @6 P) n. ^CD45-PE MHCD4504
  t# u( I/ d* H8 y! B9 HCD44-PE MHCD44043 y2 ^) o+ ^4 ~; w3 Z! g0 Y0 o+ Z0 ?
$ v, v' B1 N" O6 C
BD:0 `# T3 p/ ~5 P2 p" b+ R1 x1 X
CD73-PE 550257& L# `' x) a7 v
CD90-PE 555596
作者: cartoonyang    时间: 2013-2-26 15:26

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' M4 w7 x: P3 w# e) l6 ^6 Z% x) h1 ?: K  n
谢谢 告知！！！



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