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标题: 探讨人脐带间充质干细胞的原代分离方法 [打印本页]

作者: 硕果累累_555    时间: 2013-2-22 14:48     标题: 探讨人脐带间充质干细胞的原代分离方法

人脐带间充质干细胞的原代分离方法通常有两种:组织块贴壁法和酶消化法,那么临床上应用的脐带间充质干细胞原代分离采用哪种方法较好呢?分析利弊呢 ?
作者: newjack920    时间: 2013-2-22 16:16

对于分离这一块,只要分离后得到的细胞经鉴定后是间充质干细胞,且干细胞符合临床使用条件就可以,效果没差别。只是酶消化法不容易掌握消化时间,因为不同脐带间差异还是比较大的,而且酶消化法得到的细胞不是很纯,虽然后期经传代后可以得到比较纯的细胞。
作者: cjsbaicai    时间: 2013-2-22 16:18

个人觉得组织块贴壁法较好,这对细胞的损伤小,而且经传代二次后,能得到高纯度的脐带间充质干细胞
作者: yinfuhua    时间: 2013-2-22 16:39

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: H- M  j; C# d; Y2 n/ \
; A4 U6 X' d! @! ^( l我认为组织块贴壁法操作简单易行。虽然原代贴壁时间要长些,但传代后细胞纯度较高,长势很快。酶消化法确实存在酶的浓度、消化时间不很确定等问题,如果消化时间过长,细胞受损后很难长好的。建议用组织块贴壁法。
作者: 硕果累累_555    时间: 2013-2-22 17:10

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, ?. g$ x+ M: f; s9 b; j8 ^: g0 H9 q/ Z( n
我之前一直采用原代组织块贴壁培养法,但是听说这种方法分离的原代细胞混杂的细胞较多,不如酶消化法,而酶消化法原代不好消化,粘度较大,不易分离的。
作者: 硕果累累_555    时间: 2013-2-22 17:11

还有干细胞的临床使用条件是什么呢?还望高手解答,谢谢@~
作者: yinfuhua    时间: 2013-2-22 23:58

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7 v; W; }. g( |3 ~, ^" V' k5 s
; o( {2 R2 |; ]# |! N4 G0 r传代后混杂的细胞会很快消失的。你可以试下。
作者: 硕果累累_555    时间: 2013-2-23 09:28

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/ c9 M" S* ~7 l# j4 M) ^) D3 m$ Z% _2 o+ P5 N: |
传代后混杂细胞很容易就消失,怎么鉴定呢?
作者: yinfuhua    时间: 2013-2-23 11:12

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8 q' F" O. X7 r9 b7 N+ s, N, {2 c  f+ O+ ~0 B9 y% d
可以做流式鉴定。
作者: 硕果累累_555    时间: 2013-2-23 20:53

回复 yinfuhua 的帖子) U1 {* m! Q7 J. U3 Z

4 K$ C2 ]2 p7 k1 d. q' O听说混杂的细胞也可能表达MSC的标记物呢?有哪些较精准的MARKER呢
作者: yinfuhua    时间: 2013-2-23 23:09

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/ R* `; {1 G3 f/ U7 {6 X
# v' |! R( e4 i8 {- l没有绝对的Marker。基本检测有CD34,CD29,CD73,CD105。你也可以参考一下相关的文章。
作者: 硕果累累_555    时间: 2013-2-24 14:59

回复 yinfuhua 的帖子# s& o4 {3 R, N' I" ^+ R

  e$ |- w  D% Q, A好的谢谢& `6 ~: L- M; T$ {+ m! q! J

作者: 硕果累累_555    时间: 2013-2-24 16:26

酶消化法纯度较高,但是操作复杂,组织块法操作简单,培养周期较长!




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