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标题: CIK细胞换液问题，求解，谢谢 [打印本页]

作者: 113305060 时间: 2013-2-26 10:14 标题: CIK细胞换液问题，求解，谢谢

CIK细胞一般都是向培养瓶中添加含IL-2的培养基，是不是每次添加都要对细胞进行计数，保持每ml细胞量为1*10 6次方？一般是2-3天添加一次吗，每次都是扩一倍？求解答，谢谢

作者: ljl1988115 时间: 2013-2-26 10:18

保证CIK的密度维持在1-2*106是最好的，不必每次都计数，在扩大培养容器时，比如T75转到T225时计数就可以了

作者: 硕果累累_555 时间: 2013-2-26 10:22

不用每次都计数，细胞密度保持适中即可，扩大倍数根据细胞生长状况决定，通常隔1-2天换液一次。

作者: ljl1988115 时间: 2013-2-26 10:23

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CIK不能换液吧，补液就可以了

作者: 硕果累累_555 时间: 2013-2-26 10:28

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哦抱歉打错了扩大体积就是补液

作者: 流云阿凯 时间: 2013-2-26 10:38

不用每次计数，那样很麻烦的。根据细胞长的快慢，而决定补液时间，通常隔一天补液一次。

作者: 113305060 时间: 2013-2-26 11:03

如果不是每次计数的话，请问一次补液补多少啊？我第一次养，没经验，呵呵

作者: cheeray 时间: 2013-2-26 11:05

不需要计数。。在显微镜下查看细胞状态。太密集了就要加液。。。培养基太黄了也需要加液。

作者: cheeray 时间: 2013-2-26 11:07

至于每次补液的体积。。要看你细胞的密度。。你可以根据你第一次加液的情况。看细胞密度大约是什么样子。。。然后细胞增值后。。加液前先混匀，在确定补加多少。。。差不多就可以了。。没必要那么严格。。

作者: 113305060 时间: 2013-2-26 11:08

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哦，明白了，那我一开始是20ML，后来补液是隔一天加10ML，应该差不多吧，我看文献说一般16-17天就可以收细胞了，达到10的九次方数量级。

作者: xiaolong 时间: 2013-2-26 11:14

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楼主如果是搞科研的建议每次加液前给细胞记下数，如果是大规模的商业生产，就没必要计数了，细胞生长要有一定的细胞浓度，太低了不利于细胞增殖，太高了营养物质容易跟不上，细胞量大起来就扩一倍吧，不一定就是2-3天添加一次

作者: cheeray 时间: 2013-2-26 11:15

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也没必要隔天加。。后期等细胞长起来后，可以一次加几百。。经常处理细胞也会增加污染的几率。

作者: 莫邪小仙 时间: 2013-2-26 15:26

我们每次换液时都是计数的，根据计数结果决定换液量，是半量换还是三分之二换。看起来麻烦其实也不麻烦，换液前总是要把瓶内细胞混匀的，然后取出一些用血细胞计数仪测数，再决定怎么换。换液间隔没有固定的时间，细胞长的快了就换的勤一些，长的慢了换液间隔就长些，一般的都隔天换，若是从1扩增成3 那么就三分之二换喽

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