干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 细胞代数问题 [打印本页]

作者: AIR-JPC 时间: 2013-2-28 08:03 标题: 细胞代数问题

求教：冻存与解冻的过程，对细胞代数有影响吗？细胞代数是怎么回事呀？谢谢前辈指教！

作者: bibottll 时间: 2013-2-28 09:39

如果你冻存的时候是p1代，那么解冻的时候就是p2代

作者: zpzp0312 时间: 2013-2-28 09:45

一般来说，消化并传代一次算作一代。7 R- j1 Y! ~4 J! f/ L( r" Z
如果是P1代的细胞消化后-冷冻-解冻-接种。应该就是P2

作者: monk125 时间: 2013-2-28 10:51

代数按传代次数定义的，一般来说，你需要将前几代的细胞大量扩增然后冻存几十管液氮保存起来，随着传代次数的增多，细胞系可能在传代过程中发生这样或那样的突变，时间久了跟第一代的差异可能会差异极大，所以你尽量大量冻存，以后复苏只用前几代的细胞。另外一个细胞系，你养了两三个月就该丢掉了。为了保持稳定性，不需要冻存放起来了。

作者: 呼吸 时间: 2013-2-28 11:15

体外培养的组织或细胞与体内相比仍然存在着较大的差异。因此，当组织细胞被置于体外培养后，失去神经体液的调节和细胞间的相互影响，生活在缺乏动态平衡的环境中，日久天长，细胞形态和功能都会发生一定程度的改变，即体内、外细胞存在差异。细胞在体外培养时间越长，差异越大。体内、外细胞的差异关键在于细胞的分化。
体外培养细胞分化变化表现：1、不适应，即细胞失去原有组织结构和细胞形态，分化减弱或不显，是由于环境的改变而出现的变化； 2、脱分化或去分化，即细胞失掉发生分化的能力，可能是基因变异所致。

作者: AIR-JPC 时间: 2013-3-1 08:01

也就是说，冻存细胞使细胞停止分裂停留在较早阶段，与它固有特性最相近；而体外培养的细胞经过多次分裂后就会离最原始的形态功能越来越远。我要做的也应当是在细胞最初的状态下完成自己的实验吧，感谢大家帮我理清了思路，抓住了问题的关键！

作者: willow0711 时间: 2013-3-1 08:48

zpzp0312 发表于 2013-2-28 09:45
) E W! g- @: \7 L一般来说，消化并传代一次算作一代。- n4 k |, E/ }- |6 [+ t$ \, V
如果是P1代的细胞消化后-冷冻-解冻-接种。应该就是P2

如果我分离后就冻存了，复苏后要算第几代呢？
因为实验室条件有限，所以我们分离出来就冻存了

作者: 硕果累累_555 时间: 2013-3-1 09:16

原代分离算是P0代，直接冻存要保证细胞数量充足，否则复苏的P1代细胞可能活性不好，或者数量太少生长不起来。

作者: willow0711 时间: 2013-3-1 10:32

回复硕果累累_555 的帖子' |3 J2 L5 B; P

哦，当时时间和紧，有些条件也不具备，所以分离后只能先冻存了

作者: zpzp0312 时间: 2013-3-1 13:01

回复 willow0711 的帖子
9 ]" V/ ^1 B% y* {# O- T% W4 C
原代是P0
复苏后是P1

作者: daviddow 时间: 2013-3-3 12:14

复苏一个次算1代。冻存对细胞没影响，因为有些细胞系都用了几十年了

作者: hbs08230 时间: 2013-6-20 17:45

本帖最后由 hbs08230 于 2013-6-20 17:46 编辑 + X$ Q/ w2 N! R% R: G6 v

复苏加一代，传代加一代。9 a ]! Q! F6 a/ i, S) Q4 B& q @; m

P0买回来，传3代就可以冻，冻起来的都是P3。复苏一支出来，就是P4。如果在15代冻的，复苏出来就是P16。

作者: 漂泊的风 时间: 2013-6-21 08:08

我们认为冻存和复苏的细胞是同一代数的，即冻存的是三代，复苏时还是三代。

作者: cantonchn 时间: 2013-6-21 08:52

回复 bibottll 的帖子' c2 E8 @/ _ M6 t7 x3 M) S

哪有可能！~~~

等于说冻的是条鲈鱼，结果解冻后变成鲨鱼了？

作者: xld1984 时间: 2013-7-7 09:20

原代P0 以后每传一次代或冻存复苏一次代数升一次

作者: 三月桂花香 时间: 2013-7-15 13:53

原代分离培养的是PO代，然后收集再培养就是P1代，以此类推~冻存下去，第一代就是第一代吧，复苏还是第一代。我们是这样子算的。

作者: 20111109 时间: 2013-7-17 22:52

我一般会复苏细胞后传代的第3代4代增殖许多皿冻存起来。细胞养到~25代就不能用了，细胞的特性就会发生改变。

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)