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标题: 小型猪骨髓间充质干细胞长势不好，求指点 [打印本页]

作者: qiugt0819 时间: 2013-4-10 08:50 标题: 小型猪骨髓间充质干细胞长势不好，求指点

本帖最后由 qiugt0819 于 2013-4-10 08:52 编辑 . ^: h6 w! X9 X" [) h. j
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这是P2的细胞，个人感觉主要问题一个长得不均匀，一团团的，另外杂质细胞多较多，而且单个梭形细胞形态也不好，细胞质里面较多杂质。
请高手们指点哪些方面会出问题。原代是抽骨髓FIcoll液离心培养的，问题主要考虑：1、ficoll离心过度致细胞损伤比较大；2、原代传代时已经有一部分细胞融合了，接触抑制大量细胞老化；3、接种时没吹匀细胞；4、血清问题。0 O# `% F2 R) H; s6 ]. R
欢迎大家踊跃提出意见，谢谢！

作者: songdianyin 时间: 2013-4-10 10:39

培养基什么成分？

作者: songdianyin 时间: 2013-4-10 10:40

P2第几天这是？

作者: songdianyin 时间: 2013-4-10 10:40

接种密度？

作者: 老姜 时间: 2013-4-10 11:45

回复 qiugt0819 的帖子" i: v' ]1 P% a! i) Q
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这个细胞接种后应该已长了几天，看图是长的不错，你所说的“成团”，实质是一个细胞克隆出的细胞自然围在它的周围，单细胞形态不好一般与FBS的质量关系较大，你见过小型猪细胞比这形态好的吗（我没养过这类细胞）？若没人家好，血清的问题较大。

作者: qiugt0819 时间: 2013-4-10 21:37

回复 songdianyin 的帖子

DMEM\10％fbs\NEAA\双抗

作者: qiugt0819 时间: 2013-4-10 21:38

回复 songdianyin 的帖子
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P2第五天了

作者: qiugt0819 时间: 2013-4-10 21:39

回复老姜的帖子: P/ G. ~9 B. n* Y8 h# v4 R
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谢谢指教，这也比我之前养的好了，但跟实验室别人养的牙髓间充质干细胞相比差很远，大家都说我细胞状态不好，所以请大家给点意见

作者: mkhorse 时间: 2013-4-12 10:09

感觉细胞状态确实不好，把原代和P1的细胞图片传上来看看。

作者: henryjia 时间: 2013-4-17 04:02

有没有发现传代时，细胞脱壁时间延长，有很多细胞不收缩，或者保持贴壁？如果是这样，那说明细胞已经开始分化了。你的培养基是从哪里找来的？感觉不是太对。不过我也没养过猪骨髓MSC。经验之谈，仅供参考。

作者: songdianyin 时间: 2013-4-23 14:34

回复 qiugt0819 的帖子: r/ \& Z. H) r0 k
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3天左右的周期换液；消化传代时接种密度是否合理？

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