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标题: 急请教防脱玻片 [打印本页]

作者: 湖南干细胞    时间: 2013-4-24 13:06     标题: 急请教防脱玻片

本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-24 13:09 编辑 ! m8 Q. t# A7 L' n5 I
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请问防脱玻片用于细胞培养的,要用经过多聚赖氨酸及APES都处理过的吗?用于人脐带间充质干细胞诱导分化培养的
作者: wf78365421    时间: 2013-4-24 15:41


: T3 x% C* p* g, z$ j多聚赖氨酸玻片如何处理?- M. q0 f8 ~, u- a0 `" U
          多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:
1 ^" j3 N4 c! Q( b7 F6 ~, P1 m7 z
        (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。
. `* A4 n$ F7 O  c
& b" `3 o1 I8 y9 P8 t: ]. E        (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。
2 [) E! c# t  x; M6 G" W  x" r+ f
+ y& b, O% ^, ]( ~* W. D/ O        (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。( r# p, E2 |: N0 v" s% Y

# V3 Z% d* `8 I        (4)取出后放在无尘的地方晾干。
: N* [* e0 }: R# L% H7 e
6 K3 }7 J* c1 @( V( k0 z$ t+ Z        (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。1 n5 q2 S/ i7 L' M, f

- @3 P6 Q2 d) K. p& k        (6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。* d7 {: v, }- n

% `1 w, }0 }* L        (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。
  h' i) Y5 i) V, U9 W
/ j9 f) h* {* y 9 r+ r8 g& d% V; `; g% ^

3 V# c( s4 `& R        固定的原理:
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$ U; \# Z2 b( B9 s$ d        细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。
作者: wf78365421    时间: 2013-4-24 15:41

整个处理过程注意无菌
作者: aminhair    时间: 2013-4-24 16:55

wf78365421 你说的是免疫组化的吧?楼主要的是细胞培养所使用的方法。
作者: 湖南干细胞    时间: 2013-4-25 08:47

本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-25 08:49 编辑 9 B" }# k0 s+ e! K+ A# q
3 i' h. z1 w) {4 J# ~
回复 wf78365421 的帖子
0 p  Y0 ]! M/ u- u8 J, e( k. {8 J5 q' o7 `; w
谢谢,我想买防脱玻片用于细胞培养,不知道买经过那种处理的玻片好,有没有推荐的货号和品牌?
作者: 细胞海洋    时间: 2013-4-26 23:54

回复 aminhair 的帖子: W" o2 w" O6 M9 Q- c, B3 R

/ [3 Z1 d- a4 k. j( t; Z- b% }你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样. |' U2 y4 Q6 n2 s! u* ^
  f) ^) g5 W) E/ j% K
否则他会看不到
作者: toncv    时间: 2013-4-30 22:56

直接6孔板养不就好了
作者: toncv    时间: 2013-4-30 22:56

直接6孔板养不就好了




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