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标题: 污染细胞，高手指点一下 [打印本页]

作者: qiugt0819 时间: 2013-5-25 09:38 标题: 污染细胞，高手指点一下

像是真菌污染，大家评一下哪个环节最可能出问题，培养基还是枪头之类。

作者: jiaozi 时间: 2013-5-25 12:19

建议清洁一下培养箱

作者: sun_happone 时间: 2013-5-25 15:07

应该是酵母污染。建议丢弃，清理培养箱，以免其他细胞受到影响而污染。

作者: qiugt0819 时间: 2013-5-26 09:03

回复 sun_happone 的帖子

嗯，应该是酵母污染了，细胞已丢掉，这批细胞冻存了一部分，一部分传代，传代的就是上面污染的，现在担心冻存那部分也有问题。

作者: lumenghua 时间: 2013-5-27 14:18

污染源可能从很多环节引进的，要回顾一下没有污染到发现污染这段时间的操作，发现污染后细胞就丢弃，培养基做无菌检测，培养箱也灭菌，另外你传代后每瓶都污染了吗？看你细胞密度太大，一般细胞达到80%-90%之间我们就进行传代，避免细胞老化。

作者: prince 时间: 2013-5-27 18:23

怎么会有酵母？双抗呢

作者: MZzhang 时间: 2013-5-28 10:44

酵母菌的存在对细胞的生长与分化有什么影响啊？竞争营养这个我知道，还有其他的吗？

作者: chenzhengliang 时间: 2013-5-28 11:12

培养细胞受真菌污染后，可见培养液中漂浮着白色或浅黄色的小点，有的散在生长，培养液一般不发生混浊;倒置显微镜下可见丝状、管状或树枝状的菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中，有的呈链状排列。念珠菌和酵母菌呈卵圆形散在细胞周边和细胞之间。个体细小，有增多趋势。镜下看时，要将培养瓶用酒精棉球擦干净，以防止与瓶外尤其瓶底外面生长的菌丝相混淆。真菌污染后，细胞生长变慢，但最后由于营养耗尽及毒性作用而使细胞脱落死亡。

作者: 三月桂花香 时间: 2013-5-28 17:03

不一定是培养基或者枪头吧，可能在操作过程中污染了，或者培养箱内被污染，建议都做好清洁工作同时注意无菌操作咯。已经冻存的部分是不是可以复苏一管抽查看看是否被污染。

作者: 孙帅帅 时间: 2013-6-5 14:00

培养箱做个90℃消毒吧

作者: CELL007 时间: 2013-6-5 16:13

整个培养流程做涉及的各种试剂，都换新的。培养箱灭菌；超净台擦干净等等。然后再看看吧

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